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邱老师考题
名解造血干细胞
问答1分离和不分离CD34阳性细胞进行扩增的优缺点
2简述如何鉴定干细胞
3干细胞的分类
4简述竞争移植实验
01干细胞
一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞。其特点有①干细胞本身不是终末分化细
胞(即干细胞不是处于分化途径的终端);②干细胞能无限增殖;③干细胞可连续几代,
也可在较长时间内处于静止状态;④干细胞的不对称:由于细胞质中的调节分化蛋白不均
匀地分配,使得一个子细胞不可逆地分化的终端成为功能专一的分化细胞;另一个保持亲
代的特征,仍作为干细胞保留下来。
02造血干细胞龛
骨髓中的成骨细胞和内皮细胞与造血干细胞关系密切,分别构成HSC龛中的成骨龛
和血管龛,其中成骨龛维持静态的HSC微环境,而血管龛调控HSC的增殖、分化和动员等行
为。
03造血干细胞的及如何分离
可于:骨髓、脐血和胎肝;
骨髓中比例最高:1%-4%单个核细胞
脐血:0.5%-2.5%
外周血最低:0.05%-0.2%
骨髓和脐血是造血干/祖细胞的最佳
方法目前一般认为最早期的人造血干细胞的标记特征为:
CD34bright/CD133+/Thy-1+/CD38-/CD45RA-/(rh)-123dull/Hoechst33342dull/Lin-。
细胞分离的基本原理:
利用细胞表面特异性抗原标志来进行分离纯化。造血干/祖细胞处在代谢和的静
止期,与其他细胞在大小、密度、对药物敏感性以及表面抗原表达等方面不同,可以运用、
化学和免疫学方法进行分离纯化。
最常用的是免疫学方法:应用单克隆抗体标记的细胞免疫分离法,包括流式细胞仪
分选、生物素-亲和素免疫亲和柱层析和免疫磁珠微粒分离等方法。
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