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植物组织中dna的提取及鉴定实验报告--第1页

植物组织中dna的提取及鉴定实验报告

实验目的:

1、了解植物组织中DNA的提取和鉴定方法;

2、学习DNA凝胶电泳和显色的实验操作;

3、掌握实验数据处理和分析方法。

实验原理:

DNA提取:DNA提取是从生物体组织中分离出DNA分子的

过程。植物组织的DNA提取主要采用CTAB法,其基本步骤

如下:

1.将植物样本冷冻在液氮或在-80℃的冰箱中保存。

2.取出植物组织并磨碎,用盐水淋洗去表面的杂质。

3.加入抑制物质,如PVP(聚乙烯吡咯烷酮)和β-多聚糖。

4.加入CTAB提取缓冲液,破解细胞壁并溶解细胞质。

5.加入丙酮使DNA沉淀。

6.安排离心管,离心沉淀。

7.用乙醇洗涤、重悬DNA。

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植物组织中dna的提取及鉴定实验报告--第2页

DNA鉴定:鉴定常用的方法包括电泳、吸光度法、荧光PCR

等。本实验采用琼脂糖凝胶电泳法,基本步骤如下:

1.制备琼脂糖凝胶。

2.调制电泳缓冲液。

3.加载DNA样品。

4.进行电泳。

5.显色染色。

实验材料:

1、植物样本(如玉米叶片、小麦胚芽等)

2、CTAB提取缓冲液(含CTAB,EDTA,NaCl,Tris-HCl等)

3、琼脂糖

4、电泳缓冲液

5、DNA标准品

6、DNA分子量标记

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实验步骤:

1.取少量植物样本,将其用盐水淋洗,除去表面污垢和杂质。

2.装入离心管并加入CTAB提取缓冲液,放在60℃水浴中孵

育20分钟。

3.加入冷丙酮沉淀DNA,离心5分钟。

4.加入70%乙醇,洗涤DNA,离心5分钟。

5.将DNA重悬于1xTE缓冲液中,放在冰箱中储存。

6.取一定体积的DNA样品,加入适量电泳缓冲液稀释。

7.制备含DNA分子量标记的DNA样品,混合后加入琼脂糖

凝胶槽中。

8.加载DNA样品,与分子量标记一起进行琼脂糖凝胶电泳。

9.进行电泳10-20分钟,直至DNA分子离子迁移完毕。

10.取出琼脂糖凝胶,进行染色与分析。

实验结果:

通过电泳可见DNA样品的带状图谱,观察带状图谱的大小、

稠密程度、条带间距和条带的清晰度等特征,进而分析DNA

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样品的品质和纯度。同时,还可以使用分子量标记进行条带分

析,推断DNA分子大小。

实验结论:

通过实验,我们成功地提取出植物组织中的DNA,并在琼脂

糖凝胶电泳中对其进行了鉴定。通过电泳图谱的分析,我们可

以得出植物组织DNA的品质和纯度情况,并进一步推断

DNA分子的大小。此实验成功说明了DNA提取和鉴定的基本

步骤和操作方法,有助于我们更深入地了解DNA分子的性质

和在生命科学领域的应用。

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