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第44课微生物的培养技术及应用
·学业质量水平要求·
1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。
2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
微生物的基本培养技术
1.培养基的配制
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)种类
①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
(3)成分:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。
2.无菌技术
(1)目的:获得纯净的微生物培养物。
(2)关键:防止杂菌污染。
(3)措施:灭菌和消毒。
(4)无菌技术的主要方法及适用对象(连线)
(5)消毒和灭菌的区别
项目
条件
结果
常用方法
应用范围
消毒
较为温和的物理、化学或生物等方法
仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)
煮沸消毒法
日常用品
巴氏消毒法
不耐高温的液体
化学药物消毒法
用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源
生物消毒法
污水、污泥
灭菌
强烈的理化方法
杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
灼烧灭菌法
接种工具
干热灭菌法
玻璃器皿、金属用具
湿热灭菌法(如高压蒸汽灭菌法)
培养基及容器的灭菌
3.微生物的纯培养
(1)概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体是纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
(2)过程:包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
(3)常用接种方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
(4)实例——酵母菌的纯培养
1.培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质。(√)
2.琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。(√)
3.消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的微生物,包括芽孢和孢子。(×)
4.无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(×)
5.在采用平板划线法分离菌种时,每一次划线后都要将接种环灼烧。(√)
6.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上。(×)
1.(选择性必修3P10相关信息)牛肉膏和蛋白胨含有的营养物质有糖、维生素和有机氮等。
2.(选择性必修3P13探究·实践)(1)正常情况下在未接种的培养基表面是否有菌落生长?没有。如果有,说明了培养基被杂菌污染。
(2)在接种酵母菌的培养基上,如果你观察到了不同形态的菌落,你能分析出可能是由哪些原因引起的吗?如果观察到了不同形态的菌落,可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。
(3)培养基灭菌后,需要冷却至50℃左右才能倒平板的原因是琼脂是一种多糖,在98__℃以上溶化,在44__℃以下凝固,倒平板时高于50__℃则会烫手,低于50__℃时若不及时操作,琼脂会凝固。
考向1|培养基的成分与功能的分析
1.(2024·河北衡水模拟)培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培养基的叙述,错误的是()
A.培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
B.培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定
C.培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求
D.培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源等营养物质
C解析:培养基中含有微生物生长所需要的营养物质,还能满足微生物生长对环境的要求,A正确;根据微生物的代谢特点,配制培养基的成分,同时还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质的需要,B正确;培养基是根据不同微生物的生长繁殖需求进行配制的,不能满足各种微生物生长繁殖的需求,C错误;培养基中一般含有水、碳源、氮源、无机盐,有些还需要加入特殊营养物质等,D正确。
2.下表是培养某种微生物的培养基配方,以下说法正确的是()
成分
含量
NH4NO3
0.5g
KH2PO4
3.0g
CaCl2
0.5g
FeSO4
0.5g
维生素
少许
蒸馏水
定容至1000mL
A.该培养基中含有碳源、氮源、水和无机盐四类物质
B.该培养基可用来培养硝化细菌,不能用来培养酵母菌
C.该培养基在培养硝化细菌时,需要密封
D.要用该培养基培养酵母菌,需要加入葡萄糖作为氮源
B解析:分析题表可知,该培养基中不含有碳源,A错误;硝化细菌是自养生物,其可以利用空气中CO2来合成有机物,因此该培养基可用来培养硝化细菌,而酵母菌是异养生物,该培养基不含碳源,故不能用来培养酵母菌,B正确;硝化细菌
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