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第二节通过体细胞杂交可获得新的植物体
[学习目标]概述植物体细胞杂交的过程。
1.原生质体获得的方法
在0.5~0.6mol/L的甘露醇(或一定浓度的蔗糖)溶液环境(较高渗透压)下,用纤维素酶和果胶
酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞,消化除去细胞壁,获得球形的原生质
体。在用酶解法降解细胞壁之前,先用较高渗透压溶液处理细胞,目的是使细胞处于微弱的
质壁分离状态,防止原生质体被破坏。
2.植物体细胞杂交
(1)概念:将两个来自不同种植物的体细胞融合成一个杂种细胞,并将杂种细胞培育成新的植
物体的技术。
(2)过程
①原生质体融合的方法:电刺激、离心、振荡、聚乙二醇等诱导。
②原理:原生质体融合利用了细胞膜的流动性,杂种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能
性。
③意义:能克服远缘杂交的不亲和性,获得新品种。
判断正误
(1)在用酶解法降解细胞壁之前,需要先用较高渗透压溶液处理细胞()
(2)原生质体的融合依赖于细胞膜的流动性()
(3)原生质体包括细胞膜、液泡膜及这两层膜之间的细胞质()
答案(1)√(2)√(3)×
植物体细胞杂交的过程
如图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程示意图,请回答下列问题:
(1)步骤①需要用到的试剂是什么?
提示纤维素酶和果胶酶。
(2)步骤②所用的方法有哪些?
提示电刺激、离心、振荡、聚乙二醇等诱导。
(3)白菜原生质体(用A表示)与甘蓝原生质体(用B表示)融合后,有哪几种类型(只考虑两两融
合)?符合需要的是哪种类型?原生质体融合后,还要进行怎样的处理才能得到真正的杂种植
株?
提示有3种类型:AA、BB、AB。符合需要的是AB。融合后的原生质体再生出细胞壁形
成杂种细胞,对杂种细胞进行鉴定和筛选后,经脱分化和再分化形成杂种植株,再对杂种植
株进行鉴定和选育,才可能获得真正的杂种植株。
植物体细胞杂交的过程
步骤图解技术
原生质体酶解法:纤维素酶和果
的获取胶酶去除细胞壁
原理:细胞膜的流动性
原生质体
的融合
杂种植株
植物组织培养
的形成
(1)原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁。
(2)植物体细胞杂交的结果是获得杂种植株。
(2022·宁波咸祥中学高二期中节选)野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌
的危害而患黑腐病。利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。用一定剂
量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力,再利用此原生质体作
为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,流程如图所示。请据图回答下列问题:
(1)该过程用到的细胞工程技术有____________________、____________________。
(2)过程①所需的酶是________________,过程②中聚乙二醇(PEG)的作用是______________
________,经过②过程操作后,需筛选出融合的杂种细胞,显微镜下观察融合的活细胞中有
黑芥叶肉细胞的__________(填写细胞器名称)存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的____________,维持原生质体
的形态和活性。原生质体经过细胞壁再生,进而脱分化形成____________。
(4)若分析再生植株的染色体畸变类型,应剪取再生植株和双亲植株的根尖,制成临时装片,
在显微镜下观察并比较染色体的__________________。将杂种植株栽培在含有____________
的环境中,可筛选出具有高抗性的杂种植株。
答案(1)植物组织培养植物体细胞杂交(2)纤维素酶和果胶酶促进
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