人教版高中《生物必修一》第5章第1节温度对酶活性影响.pdf

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“温度对酶活性影响”再探究

一、使用教材

人教版高中《生物必修一》第5章第1节的探究实验。

二、实验器材

自制教具:实验透析装置(实验改进中会涉及50ML带有螺纹盖的离心管的改进)。

其他材料和用具:试管,试管夹,烧杯,三脚架,石棉网,酒精灯,冰块,温度计,水浴锅,蔗糖,

蔗糖酶,PH为4的磷酸缓冲溶液,新鲜的小肠衣,斐林试剂。

三、实验原理

(一)教材原实验

实验操作步骤进行如图1:

图1

因为0℃和100℃条件下,温度过低和过高影响了酶的活性,所以淀粉没有在α-淀粉酶的催化下得到分

解,滴加碘液后反应溶液变蓝;而60℃条件下,α-淀粉酶活性高使淀粉得以分解,滴加碘液后反应溶液不

变蓝。

原实验思路:通过检测底物淀粉的剩余情况,反映相应温度下酶的活性,进而判断温度对酶活性的影

响。

(二)再探究思路

关键问题1:为什么我们不从产物的生成情况来判断温度对酶活性的影响?

之所以原实验不提倡这样的做法是考虑到:淀粉分解后的产物为还原糖,要用斐林试剂水浴加热是否

出现砖红色沉淀来检测,水浴加热会影响最初实验的各组设置的温度,会影响对实验结果的准确判断。

关键问题2:我们能不能通过一个简易的装置将反应物与产物分开?单独的来检测产物,也就不会影响

实验设置温度了。

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问题的解决如图2:

图2

四、实验改进方案

(一)实验透析装置的改进

图3

考虑到原本的渗透装置中,长颈漏斗与半透膜连接处的气密性,于是用50ml的离心管代替了长颈漏斗

(如图3),将其尖头去掉,将其螺纹盖掏空;在半透膜的选择上,尝试了多种材料,最终发现新鲜的小肠

衣透析效果最好。将小肠衣平铺在螺纹口上,用螺纹盖拧紧,然后将反应溶液倒入到50ml的离心管中,将

其一起放置于含有少量蒸馏水的小烧杯中进行透析,一个简单的透析装置也就制作而成了。

(二)实验流程的改进(图4)

图4

(三)实验材料的改进

用蔗糖和蔗糖酶替代了淀粉和淀粉酶的原因:

1.在配置淀粉和淀粉酶溶液的过程中发现,溶液都容易沉淀,影响到我们溶液设置的浓度,进而影响到

实验结果。而配置的蔗糖和蔗糖酶溶液是无色透明且不容易沉淀的。

2.淀粉高温易糊化,粘在试管的底部,影响实验效果。

又考虑到蔗糖酶的最适PH范围比较窄,所以我们加用了PH为4的磷酸缓冲溶液,排除这一无关变量

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对实验结果造成的影响。

(四)实验试剂的改进

用斐林试剂检测产物的生成情况替代了用碘液检测底物的剩余情况。有产物还原糖生成就会有砖红色

沉淀,没有产物生成就不会有砖红色沉淀。产物还原糖越多,砖红色沉淀出现就会越快,颜色也会越深。

五、实验教学目标(核心素养)

理性思维:

1.学会测定酶活性的基本方法与技能。

2.学会操作控制变量,并学会检测收集实验证据。

科学探究:

1.在教材实验基础上,挖掘新的探究方向,更好的培养学生分析问题解决问题的综合能力和合作探究

的精神。

六、实验教学内容

通过一个简单地装置将产物(还原糖)与底物(蔗糖酶和蔗糖)分开,用斐林试剂水浴加热单独的检

测还原糖,不会影响我们实验设置的温度,进而探究温度对酶活性的影响。

七、课程实施

(一)课前准备

1.熟悉实验原理和过程。

2.老师和生物实验兴趣组的成员一起完成实验装置的改造

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