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第1页;;经过细胞匀浆和离心方法分级分离细胞组分,了解其原理、过程及作用。

;

细胞内不一样结构比重和大小都不一样。在同一离心场内沉降速度也不相同。依据这一原理,用不一样转速离心法,可将细胞内各种组分分级分离出来。;速度逐步提升,样品按大小先后沉淀;试验内容;细胞核分离提取步骤:;4.将装有滤液离心管配平后,放入离心机,2500r/min离心15分钟;⑴取上清液,移入高速离心管中,保留于有冰块烧杯中,待分离线粒体用;⑵同时涂一张上清液片②做好标识,自然干燥;⑶余下沉淀物进行以下步骤。

5.用6ml0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化钙溶液,悬浮沉淀物,以2500r/min离心15分钟弃上清,将残留液体用吸管吹打成悬液,滴一滴于洁净载玻片上,涂片③,自然干燥。

6.将①、②、③涂片用1%甲苯胺兰染色后盖上盖片即可观察。;第9页;高速离心分离提取线粒体步骤:;

1.研磨时要在低温进行。

2.过滤前要先将纱布湿润。

3.离心前要注意配平。;1.简明说明分级分离细胞原理及其意义。

2.比较一下分离细胞核时涂片①、②、③有什么不一样?涂片③在你试验结果中纯度怎样?

3.描述一下涂片⑤所见结果。;谢

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