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临床免疫检测标准操作规程(SOP)

临床免疫学实验室作为提供诊断,预防治疗疾病信息,为评估个

体健康水平对源自人体物质进行免疫学,血液学,血清学或相关方面检

查的机构,其质量保证应是其核心工作之一,临床免疫学实验室的质量

保证,贯穿于临床免疫检验整个过程,涵盖实验室内外进行的涉及临床

监测的所有活动,包括从开出化验单到发出检验结果的实验工作的所

有步骤,大致分为检测前操作,检测中控制和检测后分析三个环节,检

测前操作始于临床医生的要求,包括检查要求,患者准备,原始样品的

采集,样品在实验室内部或实验室之间的传送,检测中控制既传统的实

验室内测定,指样品的接收,检测仪器与试剂的选择,实验环境,工作条

件,质控方法,人员配制及项目测定;检测后分析是指分析后阶段,包括

对结果的系统性审查,将其格式化,对结果的解释做出报告,以及对检

测样品的储存.

一:样本的接受、收集和处理

在临床免疫检验中,实验前的质量控制主要是样品的质量控制.用于免

疫检验的临床标本最为常用的血清(血浆),使用其测定的标志物一般

是有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细

胞因子和治疗药物等,有时由于特定的检测目的,也用唾液、脑脊液、

尿液和粪便等标本.这些用于免疫检验的临床标本的质量直接影响其

最终测定质量,因此样品质量控制是临床免疫学检验质量控制的重要

组成,样品质控包括:

1.病人准备根据医生的要求,病人是否为检验做好准备,例如禁食;

是否摄取干扰检验的药物,如激素、某些蛋白制剂等.

2:标本收集根据检测的项目,要注意标本搜集是否按规定时间,标签

与标本是否相符,使用抗凝剂是否正确,分离血清时有无溶血及浑浊.

在用于激素和治疗药物测定的标本的收集,收集时间甚至体位都有可

能对测定结果产生影响.用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志

物、特种蛋白等检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影

响.

3.标本处理采集后的标本要及时运送、正确接收、分离和储存.由

于标本中某些激素、药物稳定性差,在长时间搁置或长距离运送后降

解,影响测定结果,因此标本采集后要及时送检;实验室人员收到标本

时应注意核对标本标签与申请单标签是否一致,标本是否符合项目要

求,量是否足够;最好进行唯一的编号,如果由于各种原因使用一个标

本检测多个项目,最好离心后,重新分配样品,并做好标示,以避免样品

的交叉污染;离心要充分,血清或血浆要清亮,注意避免严重溶血.

二:临床免疫学检验室内质控的内容

(一)临床免疫学实验室质量手册的编写及执行

临床免疫学实验室质量手册是临床免疫学实验室质量保证的纲领性

文件,是符合各自实验室要求的质量手册,包括质量方针、组织结构、

人员培训制度、试剂采购制度、仪器管理制度、质量保证措施、质量

控制制度、实验室环境要求,还要建立必要的内外部的质量上审核制

度.

(二)实验室环境设施和仪器设备的质量保证

临床实验室开展免疫学试验应具备一定的工作环境条件,工作区内无

磁场、无噪音,室内温度湿度适宜,并具备应有的安全消毒及保护措施,

应进行良好保养:(1)贵重仪器应有操作卡,使用登记.(2)做好仪器应

有的日常保养和维护工作,并定期检查技术参数,定期进行校准.(3)

免疫仪器使用时均应有质控物,以检查仪器的灵敏度、精密度及准确

度.(4)免疫仪器严格执行预防系性维护制度,仪器超过允许误差范围

或发生故障,应立即检修.

(三)试剂的选择、接收、储存及校验

(四)实验室操作的标准化及流程

三:检测原理、方法与步骤

酶联免役吸附剂测定(ELISA)是1971年有瑞典学者Engrll和

Perlmann首先建立的一种运用酶标免役技术进行液体标本中微量的

物质测定的试验方法,是医学免役检验中最常用的固相异相酶免役测

定.该测定方法灵敏度高、特异性强、准确性好、酶标试剂可较长时

间保持稳定,测定方法简便易行.

原理(1)将Ag或Ab结合到固相载体的表面,并保持其活性,形成固

相Ag或固相Ab,(2)将Ag或AB与酶交联成酶标AG或酶标AB;(3)使

受检标本,酶标AG或AB以不同步骤与结合在固相载体表面的AG或

AB起反应应,形成固相化的酶标AG或AB免役复合物,反应终止,经洗

涤使固相载体上形成的酶标免役复合物与其他物质分开,通过抗原抗

体反应而固相化的酶