T_CVMA 172-2024 猪繁殖与呼吸综合征病毒磁微粒化学发光抗体检测方法.docxVIP

ICS11.220CCSB41

团体标准T/CVMA172—2024

猪繁殖与呼吸综合征病毒磁微粒化学发光抗体检测方法

Magneticparticlechemiluminescentimmunoassaydetectionofantibodiesagainstporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus

2024-7-4发布2024-7-4实施

中国兽医协会发布

T/CVMA172—2024

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由洛阳现代生物技术研究院有限公司提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件起草单位：洛阳现代生物技术研究院有限公司、洛阳莱普生信息科技有限公司、西南民族大学、河南科技大学、许昌市动物疫病预防控制中心、西藏自治区动物疫病预防控制中心。

本文件主要起草人：王善普、汤承、李玉婉、岳华、张鹏翼、田中、董海岚、郭晓波、秦保亮、杨涛、王大民、马健、杜伟国、王润清、李歌、德吉玉珍、格桑央宗、边巴央拉、扎西卓玛、卓玛央吉、龚彦、姜利英、王留幸、韩妙层。

T/CVMA172—2024

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猪繁殖与呼吸综合征病毒磁微粒化学发光抗体检测方法

1范围

本文件规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒磁微粒化学发光抗体检测方法的试剂耗材与仪器设备、技术原理、实验前准备、操作步骤、试验成立条件、结果计算及判定标准等内容。

本文件适用于猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的检测，用于猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的免疫筛查、辅助诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

化学发光免疫分析chemiluminescenceimmunoassay；CLIA

将化学发光系统与免疫反应相结合，用发光相关的物质标记抗体或抗原，与待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的发光标记物，加入发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或定性检测。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

CLIA：化学发光免疫分析（chemiluminescenceimmunoassay）

PRRSV：猪繁殖与呼吸综合征病毒（PorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirus）

HRP：辣根过氧化物酶（HorseradishPeroxidase）

RLU：相对光单位发光值（RelativeLightUnit）

EDC：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（碳化二亚胺）[1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimidehydrochloride]

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5技术原理

本文件采用磁微粒化学发光--间接法原理。用猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2重组蛋白包被磁微粒，HRP标记羊抗猪IgG制备酶标二抗，待测样本中的抗体与酶标二抗结合形成抗原--待检抗体-酶标二抗复合物，该复合物催化发光底物液发出光子，发光强度与待测抗体的含量成正比。根据样本发光值与阳性对照发光值的比值，判断猪繁殖与呼吸综合征抗体水平，比值越大，说明样本猪繁殖与呼吸综合征抗体水平越高；比值越小，说明样本中猪繁殖与呼吸综合征抗体水平越低。

6试剂与耗材

6.1包被磁微粒混悬液，按照附录A制备。

6.2酶标二抗（HRP标记羊抗猪IgG）。

6.3相关试剂的配制，按照附录B配制。

6.4阳性对照和阴性对照的制备，按照附录C制备。

6.5全自动化学发光免疫分析仪。

6.6可调单道移液器（0.5μL～20μL、10μL～100μL、20μL～200μL、100μL～1000μL）。

6.7一次性采血器（5mL、10mL）。

6.8离心机（15000r/min）。

6.9顶入式搅拌器。

6.