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1)试样消化A、样品粉碎过40目B、称重高蛋白样品:0.5~1g;低蛋白样品:2~3g。C、加催化剂(K2SO4或Na2SO4和CuSO4)、浓硫酸D.消化E、空白消化加0.5g蔗糖(或不加试样)返回2)氨的蒸馏常量蒸馏法半微量蒸馏法返回3)空白测定消耗0.1mol/L盐酸标液不得超过0.2mL。消耗0.02mol/L盐酸标液不得超过0.3mL。返回粗蛋白质(%)=(V1-V2)×C×0.0140×6.25m×V’/V5.计算式中:V1——滴定试样时所需盐酸标液,ml;
???V2——滴定空白所需盐酸标液,ml;C——盐酸标液浓度,mol/L;
????m——试样质量,g;
????V——试样分解液总体积,ml;
????V’——试样分解液蒸馏用体积,m/L;
????0.0140——每毫克当量氮的克数;
????6.25——氮换算成蛋白质的平均系数。返回6.注意及误差1)重复性CP在25%以上,允许相对偏差为1%。CP在10%~25%之间,允许相对偏差为2%。CP在10%以下,允许相对偏差为3%。2)试样的粉碎粒度3)试样的用量4)样品的消化硫酸用量,据样品用量确定;硫酸钾或硫酸钠的用量不能过大;消化液冷却后呈固态,则说明硫酸钾用量过大或硫酸不足;消化液浑浊,应冷却后加入H2O2再加热;消化时,应在瓶底加热。5)蒸馏的方法和时间6)盐酸标液的浓度常量法中标液取0.1M较合适;半微量法中标液在0.02~0.05M较合适。紫外分光光度法双缩脲法6.粗蛋白的其他测定方法四、饲料粗脂肪的测定(GB/T6433—94)1.测定原理在Soxhlet脂肪提取器中用乙醚提取试样,据试样质量和残渣质量之差计算脂肪含量。脂肪中含有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等。测出的脂肪含量即为乙醚浸出物etherextract(EE)2.仪器索氏脂肪抽取仪脂肪测定仪3.操作步骤滤纸恒重105℃下样品恒重取样并包于滤纸放入抽提瓶浸提105℃下恒重称重试样粉碎至40目测定水分后的样品取出滤纸包使乙醚挥发4.计算式中:W─试样质量,g
?????????W1─装有试样滤纸包浸提前质量,g
????????W2─装有试样滤纸包浸提后质量,g粗脂肪(%)=W2-W1W×1005.注意及误差1、重复性
EE在≥10%,允许相对偏差为3%。
EE10%,允许相对偏差为5%。2、样品、抽提器、有机溶剂需脱水处理;3、试样粗细度适宜;4.测定时应在通风处进行。五、饲料中钙的测定(GB/T6436—92)1.测定原理CaCl2+(NH4)2C2O4CaC2O4↓+2NH4ClCaC2O4+H2SO4CaSO4+H2C2O4KMnO4+5H2C2O4+3H2SO410CO2↑+MnSO4+8H2O+K2SO42.试剂(1)硝酸(2)盐酸溶液:1+3(3)硫酸溶液:1+3(4)氨水溶液:1+1;1+50(5)草酸胺溶液(42g/L):4.2g草酸胺溶于100mL水中(6)高锰酸钾标准溶液[c(1/5KMnO4)=0.05mol/L](Na2C2O4标定)(7)甲基红指示剂(1g/L):0.1g甲基红溶于100mL95%乙醇中2008年12月20日10:17:20*********饲料常规成分分析目的要求1.掌握moisture、crudeash测定;2.掌握CP(crudeprotein),crudefat[etherextract(EE)]的测定;3.掌握Ca、P的测定。一、饲料水分的测定(GB?6435-86)1.饲料中初水的测定
鲜样在60~65℃的恒温干燥箱中烘8~12h,失去部分水份后,再回潮与空气湿度保持平衡,失去的水分为饲料的游离水即初水。2.饲料中吸附水的测定A.原理:105±2℃、一个大气压下烘干,试样至恒重,逸失的重量为水分(奶制品、动物和植物油脂及矿物质除外)。电子天平B.水分测定相关设备冷冻真空干燥仪干燥箱冷冻干燥仪C.测定步骤称样皿恒重称取试样,用滤纸包好并放入称样皿105℃恒重燥器冷却称重粉碎试样过40目脱脂滤纸恒重D.计算??式中:W1──
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