mRNA疫苗及药物中dsRNA杂质定量检测-ELISA法.docxVIP

GB/TXXXXX—XXXX

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ICS65.020.20

CCSB38

团体标准

T/FDSAFORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXX

FORMTEXT?????

mRNA疫苗及药物中dsRNA杂质定量检测-ELISA法

QuantitativedetectionofdsRNAimpuritiesinmRNAvaccinesanddrugsbyELISAmethod

（征求意见稿）

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

FORMTEXT中国食品药品企业质量安全促进会??发布

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目次TOC\o1-2\h\z\u

前言 II

引言 III

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 1

5dsRNA杂质定量检测方法 1

5.1dsRNA标准品 2

5.2dsRNA标准品制备及修饰 2

5.3dsRNA标准品赋值技术 2

5.4dsRNA标准品稳定性考察 2

5.5ELISA抗体对的选择 2

5.6ELISA方法学验证 2

5.7ELISA检测流程 2

参考文献 5

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前言

本文件按照GB/T1.1－2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国食品药品企业质量安全促进会提出并归口。

本文件起草单位：武汉瀚海新酶生物科技有限公司、国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量监测与评价重点实验室、中生复诺健生物科技（上海）有限公司、硅羿科技（上海）有限公司、江苏申基生物科技有限公司、云顶新耀医药科技有限公司、深圳源兴基因技术有限公司、苏州艾博生物科技有限公司、北京引正基因科技有限公司、楷拓生物科技（苏州）有限公司、成都威斯津生物医药科技有限公司、成都迈科康生物科技有限公司、惠正奇医药（广州）有限公司、固安鼎泰海规生物科技有限公司、广州正达医药科技有限公司、百奥泰生物制药股份有限公司、深圳深信生物科技有限公司。

本文件主要起草人：杨广宇、耿玉杰、李梁、陆家海、叶宇翔、唐雪明、竺添、武飞飞、刘兰、黄东明、肖潇、黄磊、缪佳颖、高尚、沈明云、宋卫卫、顾文艺、于磊、黄贤明、梅雄、李文华。

引言

mRNA新冠核酸疫苗的开发和成功应用，快速推动了mRNA技术在预防性疫苗、治疗性疫苗和治疗性药物领域的广泛应用，mRNA与药物在疗效、研发速度周期、成本价格、生产的可拓展性和安全性等方面具有显著优势。其中，mRNA原液的制备和转录是疫苗生产的关键步骤，mRNA的质量直接决定了疫苗的临床表现。

在IVT（体外转录）的过程中，T7RNA聚合酶可能以RNA或DNA（模板链与非模板链）为模板进行转录，形成不同类型的dsRNA副产物。dsRNA所表现出的免疫原性，一方面会因为自身免疫系统与翻译系统间的反馈调节而降低mRNA的翻译效率；另一方面，dsRNA使机体形成记忆免疫，当mRNA药物需要重复给药时，会造成药物效力降低。因此，需要在mRNA疫苗药物的生产过程中严格控制dsRNA的含量，这就要求生产厂商能对dsRNA进行精确定量检测。

为促进mRNA疫苗和药物制备生产过程中dsRNA杂质含量精准控制，建立了dsRNA标准品选择标准、赋值策略以及抗体对选择原则，并根据ELISA法操作流程及方法学验证标准，制定本文件。

2020年8月，国家药监局药审中心发布《新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则（试行）》，2022年5月国家药监局药审中心发布《体内基因治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》。美国药典（USP）分别于2022年2月和2023年4月发布第一版和第二版《AnalyticalProceduresformRNAVaccineQuality（DraftGuidelines）》。2022年4月，WHO发布《evaluationofthequality,safety