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第1页;第2页;考纲要求;;第5页;第6页;第7页;第8页;第9页;第10页;小思索:将含有某种生物不一样基因许多DNA片段,导入受体细菌群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不一样基因,称为基因文库。建立基因文库,便于随时获取目标基因。
小讨论:构建基因表示载体时,没有加入开启子。
小应用:基因治疗普通针对极难用普通药品进行治疗遗传病。;
1.基因拼接理论基础
(1)DNA是生物主要遗传物质。
(2)DNA基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。
(3)双链DNA分子空间结构都是规则双螺旋结构。;2.外源基因在受体内表示理论基础
(1)基因是控制生物性状独立遗传单位。
(2)遗传信息传递都遵照中心法则阐述信息流动方向。
(3)生物界共用一套遗传密码子。
;3.基因工程基本工具;;;;【例1】以下关于基因工程叙述,错误是()
A.目标基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类惯用工具酶
C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表示胰岛素原无生物活性
D.载体上抗性基因有利于筛选含重组DNA细胞和促进目标基因表示;
解析:目标基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物;基因工程中惯用工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶;大肠杆菌为原核生物,不含有内质网和高尔基体等细胞器,不能对蛋白质进行加工,其合成胰岛素原无生物活性。运载体中抗性基因为标识基因,其作用是有利于筛选含重组DNA细胞,不能促进目标基因表示。
答案:D
评析:本题考查基因工程工具、目标基因起源及标识基因作用。;?变式1:除了以下哪一项之外,其余都是基因工程运载体所必须具备条件()
A.能在宿主细胞中复制并保留
B.含有多个限制酶切点,方便与外源基因连接
C.含有标识基因,便于进行筛选
D.是环形状态DNA分子
解析:原核细胞如细菌核DNA也是环状DNA,但不能作运载体,因为它不具备A、B、C三个条件。
答案:D;
1.目标基因获取
(1)从基因文库中获取目标基因
优点:有了基因文库,就能够随时从中提取所需要目标基因,引入受体细胞使之表示。
(2)人工合成目标基因;第22页;(3)利用PCR技术扩增目标基因
①PCR:是一项在生物体外复制特???DNA片段核酸合成技术。PCR扩增是获取目标基因一个非常有用方法,也是进行分子判定和检测一个很灵敏方法。
②目标:经过指数式扩增获取大量目标基因。;2.基因表示载体构建
(1)目标:使目标基因在受体细胞中稳定存在,并能够遗传给下一代,并使目标基因能够表示和发挥作用。
(2)基因表示载体组成:目标基因+开启子+终止子+标识基因+复制原点。;①开启子:一段有特殊结构DNA片段,位于基因首端。它是RNA聚合酶识别、结合部位。
②终止子:一段有特殊结构DNA短片段,位于基因尾端。作用是使转录过程停顿。
③标识基因:普通为抗生素抗性基因或荧光基因等,其作用是判别受体细胞中是否含有目标基因(目标基因是否导入成功)。
(3)基因表示载体构建方法;第26页;3.将目标基因导入受体细胞
(1)目标:目标基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表示过程。
(2)受体细胞种类不一样,导入方法不一样;受体细胞种类;(3)受体生物不一样,所用受体细胞种类也不相同
a.植物:能够是卵细胞(受精卵)、体细胞(可经组织培养成为完整植株)。
b.动物:受精卵(因为体细胞全能性受到严格限制)。
(4)转化实质:目标基因整合到受体细胞染色体基因组中。;4.目标基因检测与判定;;;;;第35页;A.①过程需要酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
B.②要用限制酶切断质粒DNA,再用DNA连接酶将目标基因与质粒连接在一起
C.假如受体细胞是细菌,能够选取枯草杆菌、炭疽杆菌等
D.④过程中用原料不含有A、U、G、C;解析:①过程是逆转录,利用逆转录酶合成DNA片段,需要原料是A、T、G、C;②是目标基因与质粒DNA重组阶段,需要限制酶切断质粒DNA,再用DNA连接酶将目标基因与质粒连接在一起;③假如受体细胞是细菌,则不应该用致病菌,而炭疽杆菌是致病菌;④过程是基因表示过程,原料中含有A、U、G、C。
答案:B
评析:本题考查基因工程操作步骤;?变式2:采取基因工程方法培育抗虫棉,以下导入目标基因做法正确是()
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中
②将编码毒素蛋白DNA序列,注射到棉受精卵中
③将编码毒素蛋白DNA序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉体细胞,再进行组织培养
④将编码毒素蛋白DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉子房并进入受精卵
A.①② B.②③
C.③④ D.④①;
解析:依据基因工程普通要经历四个步骤分析,上述③④操作是正确。①将毒素蛋白注射到棉受精卵中,没有取得目标基因,②将编码毒素蛋白DNA
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