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比较四种不同来源巨噬细胞诱导方案
为探讨人外周血单核细胞、人多能干细胞(hPSC)、人脐血CD34
＋造血干细胞和人白血病细胞系THP-1这四种来源巨噬细胞诱导方案
的区别，我们通过监测不同诱导条件下巨噬细胞表型分子及其功能形
态，确定这四种来源巨噬细胞的功能。
实验方法：选择上述四种来源巨噬细胞作为研究对象，对其研究
内容主要包括：①形态观察；②采用流式细胞术对其表型分子进行检
测。
实验一：人外周血单核细胞诱导成巨噬细胞实验方案
1、实验Protocol
注释：免疫磁珠纯化CD14单核细胞体外诱导成巨噬细胞
2、实验结果展示
（1）磁珠分选纯度流式鉴定结果图
磁珠分选前PBMC中单核细胞占比10%，分选后CD14阳性率为
85.8%，代表磁珠分选技术可以获得高纯度的CD14单核细胞，如下
是结果图：
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注释：黑色为同型对照，红色的峰代表样本管
（A：分选前PBMC样本B：分选后阴性成分C：分选后阳性成
分）
（2）巨噬细胞形态特征结果图
细胞培养24h之后，大部分开始贴壁，细胞体积仍然比较小，少
部分开始伸出伪足；培养到第3天，细胞体积增大，伪足开始变得明
显；培养到第6天，伪足没有进一步增加或者伸展，细胞贴壁牢固，
体积开始进一步增大，较大的细胞直径可达40-50微米，形状从不规
则逐渐变成椭圆形，大部分细胞呈煎蛋状，小部分细胞呈梭型，培养
液中的悬浮细胞与第三天相比没有什么区别。
注释：从左到右依次是培养d1、d3、d6结果图
（3）巨噬细胞吞噬功能检测结果图
a：巨噬细胞培养到第7天，进行吞噬功能检测，流式细胞仪显示，
巨噬细胞阳性率为46%，在数量上稍微减少，根据细胞的状态和贴壁
生长方式可以判断基本上是巨噬细胞；
b：靶细胞和效应细胞共培养两个小时后，进行流式检测，见下图，
82%的巨噬细胞（包含CD14和CD14-）吞噬了淋巴瘤细胞，代表巨
噬细胞有很强的吞噬能力。
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3、实验结论
单核来源的巨噬细胞，通过应用免疫磁珠法分离CD14细胞，经
过体外的诱导分化培养成巨噬细胞，可以建立高纯度的人外周血来源
的巨噬细胞培养体系，为免疫细胞的后续研究提供基础。
实验二：人多能干细胞(hPSC)诱导成巨噬细胞实验方案
1、实验Protocol
注释：hPSC与AGM-S3基质细胞共培养及定向分化巨噬细胞
2、实验结果展示
（1）细胞形态结果图
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收集与AGM-S3基质细胞共培养3d(共培养早期)与14d的hPSC，
分别以细胞密度为5×105/mL
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