泰安市无偿献血者核酸检测分析.docxVIP

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泰安市无偿献血者核酸检测分析

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【摘要】目的:对泰安市无偿献血者血液核酸检测开展后,HBV、HCV、HIV核酸阳性的分析。方法:对经酶免两遍检测合格的无偿献血者标本,应用罗氏COBASS201血液筛查系统进行HBV、HCV、HIV核酸病毒检测。结果:61842份标本发现45例HBVDNA阳性。结论:核酸检测技术的开展,进一步提高了血液质量,保障了输血安全。

【关键词】:无偿献血者血液;HBV,HCV,HIV;核酸检测

输血是临床上重要的治疗手段,随着血液检测技术不断进步,试剂质量的提高,输血传播病毒的危险性已大大降低。尤其是核酸检测的开展,能有效缩短了乙肝、丙肝、艾滋病病毒检测的窗口期,而且还能检出酶免免疫静默感染、乙肝隐匿性感染、病毒变异株感染等。进一步加强了血液的安全性。按照《卫生事业发展“十二五”规划的要求》,2015年血液筛查核酸检测基本覆盖全国。我市中心血站2013年开始准备工作,已于2015年10月全面开展了核酸检测,利用罗氏COBASs201血液筛查系统,共筛查61842份酶免检测合格的标本。检测结果分析如下:

1材料与方法:

1.1标本来源:2015年10月至2016年1月泰安市所有采血点无偿献血者的标本。男性40413例,女性占21412例。其中18至25岁的178759例,26至35岁的15487例,36至45岁的16130例,46至55岁的12034,56岁至60岁的316例。,所有标本按照《献血者健康检查要求》按卫生部要求通过酶免进行乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒两遍检测,结果为无反应性和可疑标本再进行核酸检测。所有标本符合核酸检测的要求。

1.2试剂:核酸定性试剂COBASTaqScreenMPXtest罗氏诊断试剂有限公司提供。

1.3仪器:HamiltonStar标本混样仪,cobasAmpliprep核酸提取仪与cobasTaqMan分析仪。通过混样和数据管理服务器(PDM)连接组成平台。

1.4方法:

1.4.1混样:将已离心带分离胶的核酸检测标本,使用HamiltonStar自动混样仪,采用六混样的模式。每六个标本各取166.7ul的血浆,混入一个pool中,总体积为1ml。

1.4.2病毒核酸提取:把混好样的pool样本,通过传递窗口转入cobasAmpliprep核酸提取仪中自动完成核酸的提取。

1.4.3病毒核酸扩增:提取好的核酸样本自动转到cobasTaqMan分析仪中,完成核酸扩增与数据分析。核酸检测结果为非反应性的样本记录为NR(NoN-Reactive),检测结果为反应性的记录为R(Reactive)。如果6份标本组成的pool检测结果为非反应性,则该批标本检测完成;如果pool检测结果为反应性,则组成pool的6份标本进行拆分单检。

1.4.4核酸阳性的pool的拆分:所有阳性pool标本均需要拆分,对标本进行单个检测。每个样本取样为1ml,核酸提取、扩增步骤同六混样检测。对pool阳性标本拆分为阴性的,判为阴性,反之判为阳性。

1.4.5按照COBASTaqScreenMPXtest试剂盒说明书中步骤检测要求,每批次实验均设置1个阴性,3个阳性对照。要求阴性对照没有扩增信号,阳性对照检测均在相应范围内,任何对照不符,本批实验无效,需重新混样进行检测。

2结果:

2.161842份酶免阴性标本,应用HamiltonStar标本混样仪共混合pool数10608,COBASs201血液筛查系统进行HBV、HCV、HIV核酸病毒检测,共发现52个反应性pool,对这些反应性pool进行拆分共发现45个样本呈HBVDNA阳性,漏检率0.07%,未检出HCV、HIV病毒。反应性pool有效拆分率为86.5%。无效pool6个,无效率0.06%。

2.2无偿献血者血液标本核酸检测结果统计如下表

总人数

HBVDNA阳性人数

阳性率

61842人

45

0.07%

18-25岁

17875人

6

0.03%

26-35岁

15487人

12

0.07%

36-45岁

16130人

19

0.1%

46-55岁

12034人

8

0.07%

56-60岁

316人

0

0

3讨论:核酸检测在我国起步较晚,但是在血液筛查方面已显现出明显的优势。我站在61842份标本中混合pool数10608,共发现52个反应性pool,对这些反应性pool进行拆分共发现45个样本呈HBVDNA阳性,漏检率0.07%,反应性pool有效拆分率为86.5%。无效pool6个,无效率0.06%。分析无效原因是机器故障和人员操作误差。本次统计未检出H

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