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乙烯不仅调节植物种子萌发、根伸长、开花、结果、叶片衰老等发育过程，而且调

Ａｃｉｄ，ＡＣＣ）

是乙烯前体物质，ＡＣＣ合酶（ＡＣＣＳｙｎｔｈａｓｅ，ＡＣＳ）是ＡＣＣ合成限速酶。研究表明，

乙烯信号通路与ＮａＣｌ诱导的ＲＯＳ代谢途径之间存在着信号交叉，但其机制尚需研究。

本研究分析ＡＣＳ家族１２个成员中较为活跃的２个因子（ＡｔＥＲＮＡ和ＡｔＥＲＮＢ）功

能。从美国拟南芥种子资源中心（ＡＢＲＣ）购买Ｔ－ＤＮＡ插入功能缺失纯合突变体ａｔｅｒｎａ、

ａｔｅｒｎｂ种子，并通过遗传杂交技术创建ａｔｅｒｎａｅｒｎｂ双突变体。表型观察发

下，３种突变体ａｔｅｒｎａ、ａｔｅｒｎｂ、ａｔｅｒｎａｅｒｎｂ种子萌发率没有明显差别，

ＮａＣＩ处理导致ａｔｅｒｎａ、ａｔｒｅｒｎｂ以及ａｔｅｒｎａ／ｂ萌发

以上；１２０ｍＭ

其幼苗根伸长显著大于ＷＴ。初步表明，ＥＲＮＡ和ＥＲＮＢ调控拟南芥对盐胁迫的应答。

通过ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＷＴ中２个基因的ｍＲＮＡ含量，结果显示：ＮａＣＩ处理下ＷＴ根

中ＥＲＮＡ和ＥＲＮＢ转录活性显著升高，推测ＥＲＮＡ／Ｂ参与盐胁迫应答。

盐胁迫会改变植物细胞内的ＲＯＳ代谢平衡，并导致ＲＯＳ积累。检测

ａｔｅｒｎａｅｒｎｂ根部ＲＯＳ产生与积累情况：利用ＤＡＢ染色观察Ｈ２０２产生与积累，结果

１２０ｍＭ

ＮａＣｌ处理时，ｗＴ与突变体幼苗根部伸长区棕褐色加重，表明Ｈ２０２积累量增多，

但是ａｔｒｅｒｎａ、ａｔｅｒｎｂ、ａｔｅｒｎａｅｒｎｂ突变体根部伸长区Ｈ２０２

光探针标记条件下，ｃｏｎｆｏｃａｌ扫描结果显示：同样处理下

根中伸长区荧光强度值要明显低于ＷＴ根尖。此结果与ＤＡＢ染色结果一致。研究证明

植物根的生长发育与伸长区Ｈ２０２以及分生区０２‘。分布比例有关，接着利用ＮＢＴ

ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ

（Ｎｉｔｒｏ．Ｂｌｕｅｃｈｌｏｒｉｄｅ）染色观察０２。。产生与积累情况，结果显示：ＷＴ幼苗

根部分生区蓝色变浅，表明０２。‘积累量降低

变深，表明０２’。积累量增加。这一结果说明ＡｔＥＲＮＡ和ＡｔＥＲＮＢ通过减少伸长区Ｈ２０２

积累和增加分生区０２’‘积累来应答盐胁迫。

进一步检测ＲＯＳ代谢酶活性。第一，通过ＲＴ－ＰＣＲ技术，对编码过氧化物酶的关

Ｉ

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键基因ＰＥＲ３４转录水平进行检测。处理前，ｗＴ与突变体根部ＰＥＲ３４的ｍＲＮＡ水平没

有显著差异，１２０ｍＭ

水平明显高于ＷＴ。说明在盐胁迫下，ＡｔＥＲＮＡ和ＡｔＥＲＮＢ可能通过影响过氧化物酶关

键基因的表达来调节盐诱导的ＲＯＳ产生。同时也检测了与ＲＯＳ产生相关的ＮＡＤＰＨ氧

化酶（ＡｔＲｂｏｈＤ和ＡｔＲｂｏｈＦ）活性。第二，利用组织化学定位技术观察ＥＲＮＡ／Ｂ对

ａｔｅｒｎａａｔｅｒｎｂ的转基因植株。ＧＵＳ染色和酶活性检测结果显示：ＮａＣｌ处理导致

ＲｂｏｈＤ和ＲｂｏｈＦ表达略有上升，月６Ｄ办Ｄ伊：：ＧＵＳ酶活性略有增强；而

根部ＲｂｏｈＤ和ＲｂｏｈＦ表达明显上升，３个突变体株系根部ＲｂｏｈＤ：：ＧＵＳ酶活性分别

４１％、４３％、４０％，而相应的ＲｂｏｈＦ：：ＧＵＳ酶活性分别升高４４．４％、６０％、６

可以看出，ＲｂｏｈＦ表达增加量高于ＲｂｏｈＤ。第三，Ｈ２０２清除酶ＣＡＴ（ｃａｔａｌａｓ

定显示，ＮａＣｌ处理后，ＷＴ、ａｔｅｒｎａ、ａｔｅｒｎｂ、ａｔｅｒｎａｅｒｎｂ中

变体株系中ＣＡＴ活性明显低于ＷＴ。这说明，ＡｔＥＲＮＡ和ＡｔＥＲＮＢ通过调节ＣＡＴ活性

影响ＲＯＳ清除应答盐胁迫。这些结果暗示拟南芥根部ＡｔＥＲＮＡ和ＡｔＥＲＮＢ通过增强ＲＯＳ

产生酶活性和降低ＲＯＳ清除酶活性来调节盐胁迫应答。

总之，ＡｔＥＲＮＡ和ＡｔＥＲＮＢ通过增强ＲＯＳ合成酶活性和抑制ＲＯＳ清除酶活性进而

使根尖伸长区Ｈ２０２积累减少，分生区０２。。积累升高，从