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S—S培养基鉴定肠道病原菌实验结果

1．材料与方法：

1．1试验材料

1．1．1比对样品比对样品为肠道致病菌培养物，冻干半固体

细菌保存管装。

1．1．2培养基和试剂

本次比对所用的培养基由北京陆桥技术有限责任公司生产；微量

生化鉴定管由杭州滨和微生物试剂有限公司生产；显色培养基由上海

欣中生物工程有限公司生产；沙门氏、志贺氏、致泻大肠埃希氏菌诊

断血清由成都生物制品研究所生产；所有培养基和试剂均在有效期内。

1.2检验方法

按照作业指导书要求，依据现行有效的微生物检验规范和相关传

染病诊断标准进行检验。

1.3结果评价方法及依据

实验室比对是能力验证的一种方式，既要重视结果，也要重视检

验过程。评价结论分为：满意、基本满意和不满意三种。即：检验结

果符合预期结果（鉴定血清型），能提供完整属实的原始记录，报告

方式符合规范要求的为满意；原始记录较完整，检验结果、报告方式

基本符合要求（只鉴定到种）的为基本满意；无原始记录或检验结果

不符合预期结果的为不满意。

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2检验步骤

2．1增菌培养

将标本接种下列增菌液，置36±1℃培养18～24小时（碱性蛋

白胨水6小时增菌一次），增菌结果见表1

2．5血清凝集试验将分离纯化菌株血清分型，进行O抗原和H

抗原的鉴定。结果显示分离的疑似沙门氏菌与沙门氏菌A-F多价O血

清发生凝集，而生理盐水对照不发生凝集，通过与O抗原因子血清（O2、

O3、O4、O9、O11、O10等）逐一凝集试验，同时进行H因子第一相

和第二相H抗原血清学检查，分型结果为O:1,9,12,H:a,H:1,5，与

仙台沙门氏菌和迈阿密沙门氏菌血清型相符。因迈阿密是“铵强”的，

仙台是“铵弱”的[3]，故可用枸橼酸盐相鉴别。本比对样品枸橼酸

盐生化结果阴性，属“铵弱”型。

2．6结果判定综合生化鉴别试验和血清学试验结果判定比对样

品为仙台沙门氏菌。这一结果与收到的报告结果一致，评价结论为满

意。

3讨论

3.1由于比对样品为冻干半固体，故收到样品后应及时进行检测，

若不能及时检测，应置4℃或规定的温度环境保存并尽快检测。在检

测过程中应注意生物安全，避免样品被污染或检验人员受到感染。

3.2肠道致病菌除了肠杆菌科细菌外，还包括副溶血性弧菌、霍

乱弧菌等非肠杆菌科细菌，因此，实验之前设计一个完整、合理的实

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验方案是必不可少的，通过实验方案可判断实验思路是否清晰，实验

过程是否考虑周全、简练而适用，还可以防止漏检。

3.3本次共有94家实验室参加比对，其中获得“满意”结论的

有79家，占84.04%；获得“基本满意”结论的有6家，占6.38%；

获得“不满意”结论的有9家，占9.57%，其中有2家实验室分离培

养结果不正确，7家实验室因子血清与预期结果不符合。2家实验室

分离培养结果不正确，说明检验人员对细菌分离鉴定程序不熟悉，检

验思路不清晰，无独立思考、独立完成能力，或者不负责任，参照别

人的结果来编造。7家实验室因子血清与预期结果不符合，说明检验