文件(蛋白)分析和总结d.docx

机密等级：机密

作业标准 编 号

粗蛋白检验方法 标准

品 管 课 2701-0205-002

适用范围 饲料原料及成品 检讨周期：1 年

原理、定义或目的

浓硫酸在高温下可将样品中之有机氮分解成为硫酸铵,冷却后经浓氢氧化钠溶液之作用使氮素以氨气态溢出,冷凝后,再用2％的硼酸液吸收,然后以0.05mol/L硫酸液滴定之,由硫酸的用量可以计算出总氮量,经乘以特定之系数后,即样品之粗蛋白质含量。

浓HSO

2 4

有机氮————(NH

)SO+H

4 2 4

O+CO

2 2

...............分解

KSO

2

+Se

4

(NH

)SO

4 2

+NaOH Na

4

SO+NH

2 4

+HO..................

3 2

NH+H

3

BO (NH

3 3

)BO

3 3

....................蒸馏

3

HSO

2

+(NH

4

)BO

4 3

----(NH

3

)SO+H

4 2 4

BO 滴定

3 3

仪器、设备及器具

KDN-4蛋白质双排井式分解炉

KDN-4蛋白质蒸馏仪

三角瓶:250mL

分解试管

莫式滴定管:50mL

量筒:25mL

滴定架:一套

试药

浓硫酸:分析纯,比重1.84,不含氮。

40%氢氧化钠溶液(W/V):400g氢氧化钠(分析纯)溶于1000mL蒸馏水中。

2%硼酸溶液(W/V):200g硼酸(分析纯)溶于10L蒸馏水中。

催化剂:用KSO

2

(分析纯):Se(分析纯)=500:6

4

指示剂:分别称取0.1g甲基红(分析纯)与0.5g溴甲酚绿(分析纯)各溶于

100mL95%的乙醇中,然后等体积混合。

0.05mol/L硫酸标准溶液:

配制:吸取浓硫酸2.75mL,溶于1000mL蒸馏水中。

标定:称优级纯硼砂0.4-0.6g于干燥洁净之250mL三角瓶中,加蒸馏水约50mL,再加混合指示剂2-3滴,摇匀使之溶解。以0.05mol/L

修订日期 制

1999年04月27日

核准 审查 初审 制订 会审

① .④ 订

② .⑤ 实

③ .⑥ 施

年 月 日

No.3标准书用纸（210×297） （1/3)

机密等级：机密

粗蛋白检验方法 标准 2701-0205-002

计算:

硫酸标准溶液滴定至暗红色为终点,记为V。同时作空白,记为V。

O

m×1000

c(H

SO)=————————

2 4

式中:

381.37×(V-V)

O

m：称取硼砂的质量,g;V：消耗硫酸标准溶液的体积,mL;

V空白消耗硫酸标准溶液的体积,mL;

O

381.37——与1.000L硫酸标准溶液［c(H

SO)=1.000mol/L］相

2 4

测定步骤

分解

当的以克表示的硼砂的质量,g/mol。

以称量纸称取试样0.3-2.0g(准至0.1mg),包好,无损地置入干燥的分解试管中,加直径3-4mm的玻珠2-3粒,催化剂一平勺(约3.5-4.0g),再加入硫酸12.5mL,垫好橡皮圈。

将每四个试管置于消化炉上,套好排气管,开启电源,再打开通风橱在加热初始阶段,须注意观察,试样因急沸飞溅,适当调低电压。待分解液澄清透明,关闭电源,稍等片刻(急剧冷却会使试管炸裂),再将整套消化管同排气管一并拉起,使消化管移出消化炉,让其在通风柜中冷却至室温。

KDN-4蛋白质蒸馏仪的准备。

关闭各阀门。打开蒸汽发生炉之排水开关,将其中的水排净,后关闭之。

打开蒸汽阀门,打开电源,打开水龙头。

待蒸汽发生器内释放蒸气时,关闭蒸气阀。

蒸馏

在250mL的三角瓶中加入2％硼酸50mL和2-3滴混合指示剂,将该瓶套在蒸馏器的吸收管上,并让管口稍稍浸没在硼酸溶液中。

将冷却之分解试管装于蒸馏器上,旋动一下,使之紧密,打开面板左下方

的HO阀门,向试管内加入H

2

O约20mL,关闭该阀门。打开面板右下方NaOH

2

阀门,向试管内加入NaOH约50mL(至硼酸液刚出现倒吸时),关闭该阀门。

立即打开蒸气阀向试管内注入蒸气。蒸馏约7分钟后,馏液在125mL以上,将接受瓶下移,继续蒸馏1分钟后,用蒸馏水冲洗出液口,关闭蒸汽阀。

打开面板右上方抽液阀,打开抽气水龙头,抽去试管内之废液,关闭水龙头及抽气阀。取下接收瓶及分解试管。

蒸完以后,关闭电源及给水龙头,并将蒸气发生炉内之水排净。

No.3-1标准书用纸（210×297） （2/3)

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