NYT2050-2011 玉米霜霉病菌检疫检测与鉴定方法.pdf

ICS65.020

B15

中华人民共和国农业行业标准

NY/T2050-2011

玉米霜霉病菌检疫检测与鉴定方法

DetectionandidentificationofPeronosclerosporaspp.

2011-12-01实施

2011-09-01发布

中华人民共和国农业部发布

NY/T2050-2011

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目。

F习

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）归口。

本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、广西壮族自治区植保总站。

本标准主要起草人：王福样、王凯学、罩贵亮、吴志红、邓铁军、李潇楠、李菁、沈昆、朱莉。

I

NY/T2050-2011

玉米霜霉病菌检疫检测与鉴定方法

1范围

本标准规定了玉米霜霉病菌的现场检验及室内鉴定的方法。

本标准适用于玉米、甘煎、高粱等禾本科植物上玉米霜霉病菌的检疫检测与鉴定。

2原理

玉米霜霉病主要由玉蜀泰霜指霉（Peronosclerospora.maydis）、高粱霜指霉（P.sorghi）、菲律宾霜

指霉（P.户＇hili户户inensis）和甘煎霜指霉（P.sacchari）引起，该类菌〈以下简称玉米霜霉病菌Peronoscle-

ros户oraspp.）属于卵菌纲（Oomycetes），指梗霉目（Sclerosporale纱，指梗霉科（Sclerosporaceae），霜指霉

属（Peronoscleros户ora）。该病菌都是专性寄生在禾本科植物上（参见附录A），可侵染玉米的叶片和茎

轩造成系统和局部症状。这4种病菌引起的玉米霜霉病有明显的症状，病原菌有其独特的形态特征，用

特异引物对病菌DNA进行PCR扩增时可获得特异的DNA片段。病害的症状、病原菌的形态特性以

及PCR特异反应特征是鉴定玉米霜霉病菌的主要依据。

3试剂与材料

棉蓝乳酸油、吐温－20、乙醇、11.5%Na0H、0.015%TrypaneBlue、乳酸、甘泊、10倍PCR缓冲液、

玉米霜霉病菌DNA的特异性引物、d叫TP、Taq酶、5倍TBE电泳缓冲液、琼脂糖凝胶（0.8%）、吸水纸、

无菌水、蒸馆水，1000hpDNAladder等。

4仪器及用具

盖玻片、载玻片、生物显微镜、高速台式离心机、PCR扩增仪、天平、高压灭菌锅、恒温培养箱、水平

电泳仪、凝胶成像系统、PCR反应管、微量移液器、移液器、解剖刀、培养皿、烧杯、漏斗、镶子、分样筛

(5mm,4mm,3mm）、吸管等。

5现场检测

5.1产地检测

在寄主大田作物生长期逐行进行田间症状目测踏查。按要求采集有典型症状和疑似症状的玉米霜

霉病样本进行室内检验鉴定。玉米霜霉病典型症状参见附录B。

5.2调运检测

现场核实货物有关单证，