YYT 0878.1-2013 医疗器械补体激活试验 第1部分血清全补体激活.docxVIP

ICS11.040.01C30

中华人民共和国医药行业标准

YY/T0878.1—2013

医疗器械补体激活试验第1部分：血清全补体激活

Testforcomplementactivationofmedicaldevices—Part1:Serumwholecomplementactivation

2013-10-21发布2014-10-01实施

国家食品药品监督管理总局发布

I

YY/T0878.1—2013

前言

YY/T0878的总标题是《医疗器械补体激活试验》,包括以下部分：——第1部分：血清全补体激活；

——第2部分：替代途径补体激活；——第3部分：经典途径补体激活。

有关其他方面的补体激活试验将有其他部分的标准。本部分为YY/T0878的第1部分。

本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

YY/T0878的本部分参考ASTMF1984—1999《固体材料血清内全补体激活试验的标准规范》制定。

本部分与ASTMF1984—1999相比，存在以下差异：

——对ASTMF1984—1999进行了编辑性修改，删除了部分不适用的资料性内容；——-增加了前言部分；

——增加了附录A试剂和缓冲液制备。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家食品药品监督管理总局提出。

本部分由全国医疗器械生物学评价标准化技术委员会(SAC/TC248)归口。

本部分主要起草单位：国家食品药品监督管理局济南医疗器械质量监督检验中心。本部分参加起草单位：上海生物材料研究测试中心；中国医学科学院输血研究所。

Ⅱ

YY/T0878.1—2013

引言

GB/T16886.4中给出了医疗器械/材料血液相容性的试验方法以及试验的选择策略，但只给出了选择原则。YY/T0878的本部分是体外全补体激活作用的具体试验方法，可作为GB/T16886.4中医疗器械/材料补体激活试验的补充。

作为血液的重要组分，补体系统激活后产生的效应分子将直接影响医疗器械/材料的血液相容性。补体不适当的激活可能会导致机体的严重急/慢性反应。YY/T0878的本部分所描述的体外全补体激活作用的评定方法，可用来筛选医疗器械/材料是否具有潜在补体激活作用。

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YY/T0878.1—2013

医疗器械补体激活试验第1部分：血清全补体激活

1范围

YY/T0878

YY/T0878的本部分给出了医疗器械体外全补体激活作用的试验方法，本方法适用于固态样品。

注：非固态样品在使用本方法时宜确定方法的适用性。

2规范性引用文件

下列文件于文样的应用是必不可少的。儿是注日期的引用文件仅注回期彪版本适用于本文

3术语和定义

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。Ab:抗体(溶血素)

BBS:巴比妥缓冲液

BBS-G:巴比妥缓冲液-明胶

BBS-GM:巴比妥缓冲液-钙镁离子明胶

C:已激活补体

EDTA:乙二胺四乙酸二钠盐二水合物HS:人血清

PVDF:聚偏氟乙稀RBC:红细胞

5绵羊RBC的制备

5.1将市售的绵羊红细胞(SRBC)保存在Alsever溶液中，4℃贮存。贮存超过8周或者目测检查第二次清洗的上清液当中有血红蛋白时，将细胞废弃。

注：所有离心操作均在4℃条件下进行。除特别说明，所有的试剂、试管和细胞制剂均在冰上保存。

5.2将5mLSRBC在1000g下离心10min。

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YY/T0878.1—2013

5.3将细胞沉淀悬浮于10mL冷BBS-G-EDTA中，37℃孵育10min。离心并使细胞沉淀重新悬浮于

10mL冷BBS-G-EDTA中。

5.4细胞离心后，将上清液废弃(首次清洗),并使细胞沉淀重悬于10mL冷BBS-GM中。重复进行两次(共计3次清洗)。

5.5通过分光光度计或血液分析仪的测定，用冷的BBS-GM工作液调配得到10mL浓度为1.5×10?个/mL的BBS-GMSRBC悬液(如用分光光度计进行调配，约1体积上步制备的细胞悬液加入24体积BBS-GM工作液，在412nm波长下，光径为1.0cm,吸光度为0.56相当于1.5×10?个/mL的细胞浓度)。

5.6经过清洗、稀释的RBC冰上放置，至少可使用12h。

6血清(补体)的吸收

6.1宜使