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微生物药敏实验报告

篇一：微生物学实验报告

20XX级制药专业工业微生物学实验报告

姓名:刘甜甜学号:20XX304090

班级:

制药12-2班指导老师：王健

日期：20XX.6.11

一、实验目的

1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素

抑菌、杀菌的原理。2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、

杀菌的试验方法。3、了解细菌的形态特征、染色特点。

4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的

菌落特征。5、掌握细菌分离划线培养的方法。6、掌握细菌

的初步生化反应。

7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌K-b药敏纸片法。

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二、实验内容

1细菌gram’sstain染色，镜检，观察记录细菌形态和

特色特征

ˉˉ

1.1实验原理：染色原理：g+菌与g菌细胞壁不同，g+

菌比g菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，g+

ˉ

菌比g等电点低。1.2实验步骤：1.2.1.制片：○1涂

片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术自平

板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约1cm2大小，

自然干燥；

②固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次，使

菌膜牢固附于玻片表面；

1.2.2染色：①初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表

面，轻微摇动，维持30〃~40〃,细流水冲洗，切勿直接冲洗

涂片区域；

②媒染：取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面，轻微摇动，

维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗；③脱色：取95%酒精2~3

滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可,用上法细流

水冲洗；④复染：取1：10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域，

轻微摇动，用上法细流水冲洗；⑤吸水纸初步吸干玻片水分，

然后自然干燥；

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1.2.3镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100倍

目镜）下。

三、分离培养

1实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或

同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通

过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养繁

殖后生成个菌落。有时这

些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离多

次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表面多

次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。2实验步骤

2.1示教：观察普通平板、麦康凯平板、血平板、四区

分离划线平板，手机摄像。2.2分离划线培养：

预实验：以灭菌接种环与普通平板背面做四区分离划线；

正式试验：○1以灭菌接种环取细菌少许，在普通平板上划

线，划线区域约占整个平板的1/10~1/5,划线间不能有交叉

现象；○2以灭菌接种环自第一区2~3个交叉，然后依次分

离划线，约占整个区域的1/3~1/4；○3依上法进行3、4区

分离划线；○4倒置平皿置37℃温箱培养24h，观察记录实

验结果，手机摄像。

四、细菌初步生化反应：

1实验原理：具有的细菌，能催化过氧化氢生成水和新

生态氧，继而形成分子氧出现气泡。2实验步骤

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2.1色素试验：取滤纸条，两次对折，以折角小心取菌

落少许，小心展开，观察记录，手机拍照；

2.2氧化酶试验：取上述含菌滤纸条，滴加氧化酶试剂

一滴，观察记录，手机拍照；2.3触酶试验：以灭菌接种环

取细菌少许，置一洁净玻片表面，另设ns对照，各加一滴

新制的3%h2o2,观察记录，手机拍照；

五、细菌药敏试验：

1实验原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测

试的琼脂平板上