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花青素含量测定
实验目的:掌握花青素含量测定的简单方法。
实验原理:花青素又称花色素,是苯并吡喃衍生物,属于多酚类化合物,常与一个或多个葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等通过糖苷键形成花色苷,是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,也是树木叶片中的主要呈色物质,在植物细胞液泡不同的pH条件下,呈现不同的颜色。大量研究表明:花色苷具有很强的抗氧化作用,可以清除体内的自由基;降低氧化酶的活性;可以降低高血脂大鼠的甘油脂水平,改善高甘油脂脂蛋白的分解代谢;抑制胆固醇吸收,降低低密度脂蛋白胆固醇含量;抗变异、抗肿瘤、抗过敏、保护胃粘膜等多种功能J。苹果花青素主要存在于果皮中,是果皮颜色形成的重要物质。苹果中的花青素由植物次生代谢重要途径一苯丙烷类代谢形成,同位素示踪揭示花青素的碳原子分别来自苯丙氨酸和乙。苹果中的花青素由矢车菊素的三种糖苷组成,分别是矢车菊素-3一半乳糖苷、矢车菊素-3-阿拉伯糖苷和矢车菊素一7·阿拉伯糖苷J。苹果中花青素的含量主要受温度、日照等因素影响,特别是紫外光可以明显提高花青素的合成效率,因此苹果的向阳面较背阳面红L4J。Jerneja等研究表明富士苹果成熟前期是其花青素形成的重要阶段,其中矢车菊素一3一半乳糖苷占总花青素92%~98%J。
器材与试剂:
实验仪器:分光光度计,电子天平,恒温箱,剪刀,烧杯,量筒,移液管
实验试剂:0.1mol/LHCL,矢车菊素一3一半乳糖苷,甲醇,蒸馏水
实验材料:苹果
实验内容:
1、作标准曲线:采用l%盐酸甲醇配置矢车菊素-3-半乳糖苷标准系列溶液,浓度分别为100、20.0、10.0、5.0、2.5、1.0~g/mL。用分光光度计测出OD值(波长530nm),计算出标准曲线。
2、选2个苹果,把苹果皮削出,称取5g的果皮加入10mLl%盐酸甲醇溶液匀浆,在40℃下提取1h,离心后取上清液在波长530nm测出OD值。
3、计算出苹果中花青素的含量。
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