医学微生物学实验三课件.ppt

xx年xx月xx日医学微生物学实验三课件

目录contents实验三：流感病毒的分离与鉴定实验四：细菌的生化鉴定实验五：抗药性菌种筛选及药敏试验实验六：病毒的细胞培养实验七：血清学试验及凝集反应医学微生物学实验总结及展望

01实验三：流感病毒的分离与鉴定

实验目的掌握流感病毒的分离与鉴定方法了解流感病毒感染人体细胞的过程熟悉病毒培养和鉴定的基本流程掌握病毒的致病特点和预防措施

实验原理流感病毒属于正粘病毒科，是单股负链RNA病毒。根据核蛋白抗原性的不同，分为A、B、C三型，其中A型最具抗原性，变异性强，易引起大规模流行。流感病毒感染人体后，在细胞内进行复制，利用宿主细胞的生物合成机制和能量，病毒的RNA进入细胞质并在细胞质中进行转录和翻译，合成病毒蛋白质和RNA，最终形成病毒颗粒。流感病毒的分离与鉴定主要依赖于病毒培养和抗原检测等方法。常用的病毒培养方法有鸡胚培养法和细胞培养法。抗原检测方法包括ELISA、免疫荧光和核酸检测等。

步骤一采集临床样本（咽拭子或鼻咽拭子）步骤四观察病毒生长（细胞病变或鸡胚死亡）步骤二样本处理（灭活、洗涤、离心等）步骤五病毒收获与浓缩步骤三病毒接种（鸡胚或细胞培养基）步骤六病毒抗原检测（ELISA、免疫荧光或核酸检测）实验步骤

02实验四：细菌的生化鉴定

实验目的掌握细菌生化鉴定基本原理；学会细菌生化实验操作方法；掌握细菌生化反应结果判断标准。

实验原理细菌的生化反应是指细菌利用其酶系统对各种底物进行分解或合成的能力；通过细菌的生化反应，可以了解细菌的代谢特点，进一步判断其分类和归属；细菌的生化反应是细菌鉴定的重要依据，主要包括糖发酵、氧化酶、触酶等。

实验步骤采集患者的痰液、尿液、血液等样本；样品采集细菌分离培养生化反应试验结果判断将采集的样本接种于适当的培养基上，分离出目的菌株；将分离出的目的菌株接种于各种生化培养基上，观察其生长情况和产物的生化反应；根据观察结果，结合相关标准，判断目的菌株的生化反应结果。

03实验五：抗药性菌种筛选及药敏试验

掌握微生物对抗菌药物的耐药机制；了解常用抗菌药物的作用特点及抗菌谱；学会抗药性菌种的筛选及药敏试验的方法和结果分析。实验目的

通过在含有不同抗菌药物的平板上筛选出具有耐药性的菌落，并对不同抗菌药物进行对比分析，以确定菌种的耐药性；抗药性菌种筛选根据菌种的耐药性，采用纸片扩散法、稀释法等方法测定菌株对不同抗菌药物的敏感性，以确定抗菌药物对菌株的治疗效果。药敏试验实验原理

实验步骤抗菌药物平板、接种环、酒精灯、无菌操作台等；准备实验材料将待测菌株划线接种于抗菌药物平板上，于37℃恒温培养24-48小时；操作步骤观察菌落的生长情况及抑菌圈大小，对比不同抗菌药物的抗菌效果；结果观察根据抑菌圈大小，分析待测菌株对不同抗菌药物的敏感性。结果分析

04实验六：病毒的细胞培养

实验目的了解不同病毒对细胞培养的影响和感染后的细胞变化情况；学习如何通过细胞培养技术来研究和治疗病毒感染。掌握病毒的细胞培养技术的基本原理和操作流程；

实验原理病毒是一类非细胞型微生物，必须在活细胞内才能进行病毒的增殖。因此，为了研究病毒的增殖过程，必须使用细胞培养技术来进行感染和培养。细胞培养是一种在体外将细胞在一定的营养物质和气体条件下，使细胞在体外进行生长和增殖的技术。常用的细胞培养技术包括贴壁培养、悬浮培养等。病毒感染细胞后，会经历吸附、穿入、脱壳、生物合成及装配与释放等过程。这些过程受到病毒的种类、毒力、感染剂量、细胞种类等多种因素的影响。

准备工作在进行实验之前，需要准备好所需的试剂、细胞株和病毒株，并确认使用必威体育精装版的操作指南。选择适当的细胞株，将其在一定的培养液中培养，控制温度、湿度、气体等条件，使细胞在体外进行生长和增殖。将病毒株加入到细胞培养液中，使病毒吸附和穿入细胞中，然后将上清液更换为维持液，以保持细胞的营养需求。在不同的时间点观察细胞的病变情况，包括细胞形态的变化、细胞死亡情况等，并记录数据。根据实验结果进行分析，包括病毒的增殖曲线、病毒感染细胞的致死量等，并得出结论。实验步骤细胞培养观察指标结果分析病毒感染

05实验七：血清学试验及凝集反应

实验目的掌握血清学试验及凝集反应的基本原理和实验操作流程；了解和掌握抗体和抗原的特性及其在血清学试验和凝集反应中的作用；学会利用血清学试验和凝集反应进行疾病的诊断和流行病学调查。

血清学试验是指利用抗体的特异性，通过与相应的抗原发生反应，从而检测样品中是否存在目标抗原的一种实验方法。常见的血清学试验包括间接ELISA、直接ELISA、WesternBlot等；凝集反应是指颗粒性抗原与相应抗体结合后，再与凝集素结合，形成可见的凝集现象的一种实验方法。常见的凝集反应包括试管凝集反应和抗原-抗体凝集反应等。实验原理

准备实验样品：用生理盐水