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交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)
一、目的
为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞
悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机
采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法
采用微柱凝集法;
三、原理
将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系
统中进行。微柱检测系统的上端为反应室,将葡萄聚糖凝胶作为凝集
反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中,微柱凝集检测管中的凝胶
的间隙起分子筛作用。凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测
管的上面或中间,反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙,沉积
在微柱凝集检测管的底部。
四、适用范围
适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备
普通离心机;血型血清学多用离心机;37℃免疫微柱孵育器;
六、试剂
1、试剂名称:抗人球蛋白交叉配血卡(微柱凝集法)
2、试剂生产厂家:长春博迅生物技术有限责任公司;
3、批准文号:国药准字S2*******;
4、包装规格:聚丙烯卡12卡×3检测人份/盒;
5、贮藏条件;18-25℃避光保存。
6、有效期:自检定合格之日起12个月;
七、检测样本要求
1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血
等不能测定。
八、操作步骤
1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;
2、分别配制受血者与献血者0.5%-0.8%红细胞悬液
3、将受血者血清50ul与献血者红细胞悬液50ul加入主侧管中;
4、将受血者红细胞悬液50ul与献血者血清50ul加入次侧管中;
5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟;
6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟,1500rpm
离心3分钟,取出肉眼观察结果。
7、结果判断:
阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管层底部,表明受血者与献血
者血型相合;
阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中,表明受血者与
献血者血型不相合
九、质量控制
1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成
绩合格;
2、每日做室内质量控制,且要求在控。
3、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,避免笔误
等引起的差错。
4、交叉配血标本应在2~8℃保存留一周,以备复查。
十、生物参考区间
相合,不相合。
十一、注意事项与干扰因素
1、本方法可结合盐水介质交叉配血相合后进行临床发血。
2、交叉配血标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质
量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态;
3、交叉配血试验血样要求是输血前3天内的血样(预防受血者在
输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗
体)。
4、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,
每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃~8℃保存7天;
5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变
质失效;
6、患者使用的药物影响的处理:如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,
应注意将红细胞洗涤;如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精
蛋白对抗,使样本凝结;
7、交叉配血试验不相合时应注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别,可
结合盐水介质交叉配血试验镜下观察或离心去上清液后重悬观察。
8、抗体筛选试验阴性,而交叉配血结果阳性,提示有未检测明的
同种抗体存在。
9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体
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