生化--血浆脂蛋白代谢紊乱检验--图文.ppt

Apo的测定Apo的测定的方法是利用相应特异抗体试剂进行测定。测定原理是将某一特异抗体加到待测人血清中，即与血清中相应抗原形成抗原抗体复合物，根据复合物的量，即可测出血清中某一Apo含量。⒈免疫扩散法(RID)：先制备含Apo抗体的琼脂糖凝胶，间隔等距离打孔，加入待测人血清，水平置于温箱（37℃）保温24h，抗原从孔中间向周围扩散，因凝胶板中有相应抗体，经一定时间扩散后，最后在凝胶孔周围形成一圆型沉淀圈，测量其圆直径，以圆的面积大小计算血清中Apo含量。该法易受多种因素的影响，难以测准，有淘汰的趋势。⒉免疫火箭电泳（EIA）:先制备含某一Apo抗体的琼脂糖凝胶，靠近阴极端打孔，加入待测血清，进行电泳。血清中Apo抗原往正极移动，一定时间（约3h）后，即可形成类似火箭的沉淀峰，根据火箭峰高度或面积的大小计算血清中Apo含量。在严格掌握电泳条件下，本法是一种较为简便、试剂用量少的好方法。⒊免疫比浊法免疫比浊法：1）免疫透射比浊法(ITA)。2）免疫散射比浊法(INA)。1）免疫透射比浊法Apo的特异抗体与血清中相应的抗原结合形成抗原抗体免疫复合物，并形成微细颗粒，混悬于溶液介质中，光线通过这种浑浊介质溶液时被吸收一部分，吸收的多少与混浊颗粒的量成正比。该法是目前使用最为广泛的方法，快速准确，可在自动生化分析仪上作批量检测。2）免疫散射比浊法。光线通过含抗原体复合物的浑浊介质溶液的混悬颗粒时，出现光散射作用，散射光强度与溶液中混悬颗粒的量成正比。该法的进行，需要有具备测定散射光的仪器如散射比浊仪等，重复性、准确性比透射比浊好。免疫化学法：单向免疫扩散（RID）电免疫分析（如火箭电泳法）放射免疫分析（RIA）酶联免疫吸附分析（ELISA）等早期目前：目前比较适合于临床实验室的是免疫浊度法，包括免疫散射比浊法（INA）和免疫透射比浊法（ITA）。血清载脂蛋白测定【参考值】ApoAI：1.00～1.50g/L；ApoB：0.80～1.00g/L。【临床意义】ApoAI是HDL的主要结构蛋白，ApoB是LDL的主要结构蛋白，因此，ApoAI和ApoB可直接反映HDL和LDL的含量。在某些病理情况下，ApoAI与HDL和ApoB与LDL并非成正相关，因此，同时测定载脂蛋白及脂蛋白HDL和LDL对病理发生状态的分析很有帮助。冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有ApoAI下降和ApoB升高。临床上常将ApoAI和ApoB比值作为冠心病的危险指标。血清载脂蛋白测定（1）Apo测定的临床意义

作为Ａs和心脑血管病的有价值的危险予估指标。目前主要检测项目是ApoAⅠ、ApoB100、Apo（a）（2）载脂蛋白异常症的发现和诊断

如：ApoAⅠ缺乏症（Ｔangier症）

ApoCⅡ缺乏症六、载脂蛋白A-I（apoA-I）载脂蛋白AⅠ主要存在于HDL中，在CM、VLDL、LDL也有少量，主要功能是维持脂蛋白结构的稳定和完整性。已证实ApoAⅠ是通过激活LCAT来催化胆固醇酯化，将多余的CE转运至肝脏处理，因此apoA-I具有清除脂质和抗AS的作用。【检测方法】免疫透射比浊法【参考范围】1.20-1.60g/L*【临床意义】血清apoA-I反映血液中HDL的数量，与HDL-C呈明显正相关，与冠心病发生危险性呈负相关。冠心病患者、脑血管病患者水平降低apoA-I缺乏症患者血清中apoA-I、HDL-C水平极低糖尿病、慢性肝病、肾病综合症等降低apoA-I升高主要见于妊娠、雌激素疗法、饮酒等*七、载脂蛋白B（apoB）载脂蛋白B可分为两个亚类，即ApoB48、ApoB100，前者存在于CM中，参与外源性脂质的消化、吸收和运输；后者存在于VLDL、LDL中，参与VLDL的装配和分泌，在血液中，VLDL可代谢转化为LDL。【检测方法】免疫透射比浊法-常规方法【参考范围】中青年：0.8-0.9g/L老年人：0.95-1.05g/L*【临床意义】apoB是LDL的主要结构蛋白，血清中水平反映血液中LDL的数量，与冠心病发生危险性呈正相关。升高见于冠心病、高脂蛋白血症、糖尿病、肾病综合征等降低主要见于肝硬化、药物疗法及感染等*（三）游离脂肪酸测定FFA在血中浓度很低，成人0.4～0.9mmol/L；儿童和肥胖成人稍高。其含量水平受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等因素影响。血中FFA半寿期为1～2min，极短。