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第四讲RT-PCR引物设计及注意事项1

一、步骤1.查找目的基因序列2

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目的序列的选择9

TNFalpha用全称10

小鼠的TNFalpha序列11

大鼠的TNFalpha序列12

一、步骤2.在线设计引物13

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一、步骤3.在线验证引物24

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二、注意事项1.找对靶序列(要cDNA,不要gDNA)2.引物的位置(5’调控区、阅读框、3‘调控区)3.目的片段的长度(定量100-300,定性300-500bp)4.注意剪接异构体(P63为例)32

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谢谢!39

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