农药及其代谢产物的测定.ppt

杀虫脒属中等毒类，中毒症状以紫绀、嗜睡和出血性膀胱炎三大症候群为其特点。第85页,共99页，2024年2月25日，星期天接触杀虫脒的正常人，最初尿中无杀虫脒和对氯邻甲苯胺，接触4h后，则能普遍检出，接触8h到停止接触后12h为排泄高峰。故测定尿中杀虫脒和对氯邻甲苯胺的含量可作为生物监测指标。第86页,共99页，2024年2月25日，星期天三、样品采集及保存采集班后尿样或者次日晨尿200ml，贮存于聚乙烯塑料瓶中，立即测定尿比重。尿液按100∶1比例加入盐酸，于4℃冰箱内可保存2周。第87页,共99页，2024年2月25日，星期天四、尿中杀虫脒和对氯邻甲苯胺的测定重氮-偶合分光光度法气相色谱法高效液相色谱法第88页,共99页，2024年2月25日，星期天（一）重氮-偶合分光光度法1.原理尿中的杀虫脒在碱性条件下水解为对氯邻甲苯胺，对氯邻甲苯胺经重氮偶合反应，生成红色偶氮染料，于550nm波长，用标准曲线法进行分光光度测定。第89页,共99页，2024年2月25日，星期天2.样品处理和测定第90页,共99页，2024年2月25日，星期天3注意事项(1)个别样品在萃取后经饱和氯化钠溶液洗涤仍有较多的泡沫状物时，就不宜再进行洗涤，可加入适量无水硫酸钠脱水，使醚层分出。放出醚层到另一分液漏斗中，再加适量石油醚洗涤无水硫酸钠1～2次，合并醚层，再作反萃取。第91页,共99页，2024年2月25日，星期天(2)样品置90±2℃水浴中进行水解时，应塞紧试管塞，以免蒸汽冲开管塞。试管从水浴中取出后，须冷至室温方可打开管塞，以防待测物逸失。(3)加亚硝酸钠溶液时不要沾污试管口，否则会因污染而产生混浊或黄褐色。第92页,共99页，2024年2月25日，星期天(二)气相色谱法1.原理在碱性条件下，尿样中结合态杀虫脒与对氯邻甲苯胺转化成基型，用石油醚定量萃取、经缓流速氮气吹干，用硝基苯作内标、正己烷溶解，经色谱柱分离后用氮磷检测器（NPD）分别测定杀虫脒与对氯邻甲苯胺含量。第93页,共99页，2024年2月25日，星期天2.仪器操作条件色谱柱：lm×2mm不锈钢柱。固定液；3%PEG-2OM：5Ucon-50-HB-2000。担体：ChromosorbW-Hp80-100目。柱温:190℃。载气(氮)30ml/min。进样量1.0μl。第94页,共99页，2024年2月25日，星期天3.样品处理和测定在测尿样比重后取10ml于20ml具塞试管内，加0.2mllOmol/LNaOH。振摇1min，静置，加数滴无水乙醇以去泡沫。加入10ml石油醚进行萃取。取5ml醚层于离心管中，用缓速氮气吹干。用100μl硝基苯己烷溶液（20mg/L正己烷）充分淋洗管壁，取1μl进样。在气相色谱内标法工作曲线上以保留时间定性，以样品峰与硝基苯峰峰高比或面积比定量。第95页,共99页，2024年2月25日，星期天4.注意事项(1)萃取液宜用低沸点石油醚（30～60℃），以缩短挥干时间。(2)也可采用氢火焰离子化检测器FID，但灵敏度较低。第96页,共99页，2024年2月25日，星期天生物材料农药及代谢产物血液有机磷农药：有机磷：GC(FPD)HPLCGC-MS全血胆碱酯酶活性：三氯化铁、DTNB分光光度法有机氯：GC(ECD)拟除虫菊酯类：尿中代谢物：GC-MS杀虫脒：偶氮分光光度法、GC、HPLC食品农药残留量有机磷：GC(FPD)有机氯：GC(ECD)、TLC拟除虫菊酯类：GC(ECD)氨基甲酸酯类：动物性：反相HPLC（紫外检测器）植物性:GC(NPD)水质农药测定有机磷：GC(NPD/FPD)、分光光度法、TLC、GC-MS、HPLC-MS、酶法有机氯：GC(ECD)、TLC拟除虫菊酯类:GC(ECD/FID)、HPLC（紫外检测器）、GC-MS、免疫化学技术(ELISA)空气农药测定有机磷：分光光度法、色谱法、酶化学法等拟除虫菊酯类：GC、HPLC等第97页,共99页，2024年2月25日，星期天气相色谱法（GC）热导检测器（TCD）：对无机、有机气体均有响应，线性范围宽、稳定性好、不破坏样品。火焰离子化检测器（FID）：对绝大多数有