液相色谱仪的操作与基线问题处理.pdf

安捷伦液相色谱仪的日常维护及保养方法如下，一起来看看

1、手动进样器：

平常应当注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状

态清洗；假如显现漏液现象，原因极可能为转子密封垫磨损或污染，

一般要申请维护和修理或更换配件。

2、排液阀：

此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损，可

卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。

3、单向阀：

如碰到泵压不稳或流动相不能抽取，则可能是单向阀显现问题，

卸下用异丙醇超声波清洗，清洗时须按其安装的方向放置在小烧杯

中，切记不可与安装方向倒置超洗！

4、工作站：

显现死机可重起计算机；不正常运行时，首先可更换电脑测试

其硬件故障；或在本机上重新插拔接口、重新安装软件。

5、过滤器：

当色谱峰显现异常情况时，有可能是此部件被污染，拆下用异

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6、吸滤头：

特别情况下可拆下滤头抽取以判定其中是否堵塞；亦可用注射

器吸取流动相通过吸滤头打出以判定其是否堵塞。若有堵塞情况可

用异丙醇超声波清洗；清洗不成功则需要更换。

7、流动相的抽作要求：

高效液相级色谱醇，二次蒸馏水，缓冲盐肯定要过滤；

流动相脱气至关紧要（可采纳抽滤，超声波脱气等方法）

8、流通池：

在色谱峰不正常时会可能是此部件补污染。可拆卸后取出其中

的垫片用异丙醇超洗（可依据说明书进行操作或申请维护和修理）。

9、泵头：

泵头漏液或显现其它故障一般要申请维护和修理（如漏液，或

更换柱塞杆及其密封垫等）

泵压不稳：

1、泵头有气泡——流动相脱气/大流量冲洗泵/用注射器抽取流

动动相

2、单向阀故障——清洗

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由手动进样器直接进检测器），流量为3—4ml/min，冲洗50分钟

左右，然后重新安装色谱柱，更换流动相平衡，如此再不能解决泵

压波动故障，可申请更换配件。

10.漏液处置：

C18柱肯定不能进蛋白样品、血样，生物样品。

要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱

性样品。

长时间不用仪器，应当将柱子取上用堵头封好保管，注意不能

用纯水保管柱子，而应当用有机相（如甲醇）保管，由于纯水易长

霉。

流路堵塞问题：堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤

器→管路过滤器→单向阀检查，并清洗。清洗方法：①以民丙醇作

溶剂冲洗②放在异丙醇中超声波清洗③用10%稀硝酸清洗

11.缓冲盐的使用：

流动相含有盐分时，做完试验后肯定要进行流路冲洗；

首先用水冲洗，打开排液阀用PURG键转换出原有含盐的流动相，

然后关闭排液阀打开泵冲洗全部流路45分钟以上，如此更换流动相

为水和甲醇混合液冲洗全部流路30分钟（此步骤一般可省去，依据

试验而论），最后更换纯甲醇冲洗全部流路45分钟以上。

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泵头冲洗；

用备件中的针头和针管分别用蒸馏水和纯甲醇冲洗3—5ml。

如流动相不含盐，可对机器定期进行简单的冲洗维护，依据试

验多少而定。

手动进样器冲洗；

同样用备件中的针管和专用冲洗针头对手动进样器的装载状态

和进样状态分别进行冲洗3—4ml的蒸馏水，然后再冲洗3—4ml的

纯甲醇。确保每次做完试验，全部流路中充足纯甲醇！

液相色谱仪的操作与基线问题处置

高效液相色谱仪适合于分别、分析高沸点、热稳定性差、有生

理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛为化学、医学、工业、

农学、商检和法检等学科领域中针对这种精密而又运用广泛的科学

仪器。

下面我们来聊一聊基线。HPLC常见的基线问题重要有基线漂移

以及基线噪音。

基线漂移

线漂移基线漂移是色谱工普遍碰到的问题。一般说来，机器刚

起动时，基线简单漂移，约莫要30min的平衡时间，假如用了缓冲

溶液、缓冲盐，或者在低波长下（220nm）平衡时间相对会比较长，