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病原学诊断方法病毒分离(金标准)将尿等体液或组织标本接种到人胚肺纤维母细胞上,1~4周内可见细胞致病作用。利用免疫标记技术检测病毒抗原,可将培养物中病毒检测时间缩短至12~48小时。病毒分离阳性表明有活动性HCMV感染实验室检查第31页,共53页,2024年2月25日,星期天HCMV标志物的检测用光镜直接在样本中寻找典型病变细胞和包涵体(该方法阳性率低)。本病的特征性病变为受染细胞体积增大,胞质和胞核内可见包涵体,因而本病在病理学上又名巨细胞包涵体病(CID)。实验室检查第32页,共53页,2024年2月25日,星期天电镜技术检测病毒颗粒;免疫标记技术检测病毒抗原,如pp65等;分子杂交法或聚合酶链反应(PCR)方法定性地测定CMV-DNA或mRNA;还可用荧光定量PCR方法测定标本中CMV-DNA的拷贝数量。HCMV标志物的检测第33页,共53页,2024年2月25日,星期天特异性抗体可用间接免疫荧光法、ELISA法、放射免疫自显影法、捕捉ELISA法、间接免疫组化法等,检测患儿血清中的CMV-IgM和IgG抗体。抗CMV-IgM是原发性感染或活动性感染的标志,一般在原发感染后2周左右出现,持续12~28周。抗CMV-IgG在感染后终身存在,IgG抗体在短期内有4倍以上升高则表示患儿有活动性CMV感染。但难以区别原发抑或再发感染。6个月以下婴儿注意胎传抗体的存在。实验室检查第34页,共53页,2024年2月25日,星期天病理变化CMV感染人体后,可广泛分布于全身各脏器,引起细胞炎症反应,典型的包涵体出现在各组织的巨细胞内,常见于肺、肝、中枢神经系统、唾液腺、还包括肾、肠、肾上腺、膀胱、胰、甲状腺、甲状旁腺、睾丸、副睾、卵巢、心肌、眼球、骨骼、血管、皮肤等。可引起慢性间质性肾炎、肺炎、灶性肝坏死、脑坏死性肉芽肿、广泛钙化(包括脑室壁钙沉积)、肝脾等髓外造血、溃疡性肠炎等。实验室检查第35页,共53页,2024年2月25日,星期天实验室检查组织病理切片用苏木精-伊红或姬姆染色后,可见受染细胞及胞核巨大化,并有包涵体,常偏于细胞一端,可见有不染色的晕环将其与核膜隔开,使细胞呈“猫头鹰眼”样,是CMV感染具有诊断价值的特征.在巨细胞附近常有浆细胞、淋巴细胞和单核细胞浸润。第36页,共53页,2024年2月25日,星期天诊断和鉴别诊断根据《小儿巨细胞病毒感染诊断标准》*:小儿CMV感染从获得感染时间上可分为先天性感染、围生期感染及获得性感染;从临床征象上分为症状性感染和无症状性感染(症状、体征均无,和亚临床性感染);如CMV损害宿主2个或2个以上器官系统时称全身性感染,多见于先天性感染;如CMV损害主要集中于宿主的某一器官或系统,如肝脏或肺部时,称为CMV性肝炎或CMV性肺炎。*《中华儿科杂志》1999;7:441第37页,共53页,2024年2月25日,星期天诊断先天性感染:经宫内传播获得,生后2周内从新生儿体液中找到活动性CMV感染的证据即可诊断。围生期感染:在生后3~12周证实有活动性CMV感染的证据,主要经产道或母乳获得感染。获得性感染:出生12周后开始排毒或证实有活动性CMV感染的证据,主要经水平传播获得。*《中华儿科杂志》1999;7:441临床上患儿就诊前通常未做过病毒学检测,故很难确定其感染时间,一般通过CMV相关疾病症状发生的时间和临床表现帮助判断。第38页,共53页,2024年2月25日,星期天CMV感染的实验室诊断依据下述3项中任何1项阳性时,可以诊断CMV感染,而且是产毒性感染:从受检的血、尿、唾液或组织等任何一种分离出CMV;从受检的组织细胞中见到典型的巨细胞包涵体;用特异性单克隆抗体从受检组织或细胞中检测到CMV抗原,从外周血白细胞中查得CMV抗原又称CMV抗原血症。用分子杂交或PCR法从受检材料中检出CMVmRNA表明产毒性感染;检出CMV-DNA片段,只能表明CMV感染,不能区分为产毒性或潜伏性感染。第39页,共53页,2024年2月25日,星期天诊断和鉴别诊断先天性CMV感染应与弓形虫病、风疹、单纯疱疹感染(四者组成TORCH综合征)及新生儿败血症等鉴别;后天获得性CMV感染应与EBV所致的传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、肺炎等鉴别。在诊断CMV相关性疾病时要排除能引起相同病症的其它病因和病原,尤其是临床表现不能完全用CMV感染解释时,要注意寻找和发现伴随疾病,如常与CMV感染并存的胆管畸形和代谢性肝病。第40页,共53页,2024年2月25日,星期天HCMV的治疗抗HCMV药物的应
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