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一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
生物技术实验常用研究技术
层析技术
引 言
1850年德国科学家朗格首先发现了色谱分离的现象,当他把一种有颜色的物质滴到一张滤纸上,观察到它们扩散成一圈一圈的圆环。
层析法也称色谱法,是1906年俄国植物学家
茨维特( Michael Tswett )发现并命名的。他将碳酸钙细粉装入玻璃管内使其成柱形,
然后把石油醚抽提的植物叶子的色素溶液倾入,让其通过碳酸钙柱,接着用石油醚洗涤,
于是奇迹出现了,在吸附柱的不同部位出现了绿色的叶绿素,黄色的叶黄素和胡萝卜素,混合物的不同色素组分得到了分离。当时茨维特把这种色带叫作“色谱”,茨维特把他开创的方法叫色谱法(Chromatography)。
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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层析技术(chromatography)又称色谱技术、层离
技术等,是一组相关技术的总称。
层析技术是利用混合物中各组分的物理化学性质(分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等)的不同,使各组分以不同程度分布在固定相和流动相中,当流动相流过固定相时,各组分以不同的速
度移动,而达到分离的技术。
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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层析技术具有分离精度高、设备简单、操作方便等优点,样品可多可少,既可用于实验室的研究工作,又可用于工业生产,还可与其他分析仪器配合,组成各种自动分析仪器。
层析技术是当前获得高纯度产物最有效的分离纯化技术。
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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主要内容
第一节 概述
第二节 凝胶层析技术
第三节 离子交换层析技术
第四节 吸附层析技术
第五节 亲和层析技术
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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第一节 概述
一、基本概念
层析系统:
任何层析过程都是在两个相中进行的,一个是固定于支持物上的固定相,另一个是流经固定相的流动相,层析系统就是由固定相和流动相组成的。当流动相流过加有样品的固定相时,由于样品中各组分的理化性质的差异,受固定相的阻力与流动相的推力的影响不同,因而各组分在固定相与流动相之间的分布(含量对比)不同,从而使各组分以不同的速率移动,达到分离物质的目的。
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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第一节 概述
配合相应的光学、电学和电化学检测手段,可用于定性、定量和纯化某种物质,其纯度高达99%。
固定相
固定相是由层析介质组成。它可以是固体物质(如吸附剂,凝胶,离子交换剂等),也可以是液体物质(如固定在纤维素或硅胶上的溶液),但这个液体必须附载在某个固体物质上,该物质称为载体或担体(support)。这些基质
能与待分离的化合物进行可逆的吸附,溶解,交换等作用。它对层析的效果起着关键的作用。
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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基本概念
流动相
在层析过程中,推动固定相上待分离的物质向一定方向移动的液体、气体或超临界体等,都称为流动相。柱层析中一般称为洗脱剂,薄层层析时称为展层剂。它也是层析分离中的重要影响因素之一。
固定相与流动相,两相互不相溶
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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层析法是基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同,使混合物中各组分以不同程度分布在固定相和流动相中,并使各组分以不同速率移动,从而达到分离的目的
二、基本原理
一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
柱层析系统的基本组成
层析柱+层析剂
上样洗脱系统
检测系统
收集系统
三通阀
收集器
检测器
泵
泵
流动相
料液
DC
BA
层析柱
(a)层析系统基本组成
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一位艾滋病血清检验呈阳性的患者在接受了抗逆转录病毒治疗之后,恢复健康的机率增加了一倍,甚至有的患者在接受治疗后将不再具有传染性。
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时间(或流出体体积)
流出组分浓度
A B C
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