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不同浓度的bFGF和EGF对体外培养的视网膜色素上皮细胞增殖的影响的开题报告
引言:
视网膜色素上皮细胞(RPE)是位于视网膜后极的一层具有生物学特征的细胞,是维持视网膜形态和功能的关键细胞之一。正常情况下,RPE细胞可进行代谢活动、泵送离子、维持色素重建以及参与维持视网膜内外环境的稳定等生理过程。RPE细胞异常则会导致许多疾病,如老年性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变等。
视网膜色素上皮细胞的增殖对其生理功能和病理状态的维持和恢复非常重要。许多研究表明,生长因子对RPE细胞增殖和分化有重要的影响。生长因子是一类能够促进细胞生长和分化的细胞因子,包括基同因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)等。
本研究旨在探究不同浓度的bFGF和EGF对体外培养的RPE细胞增殖的影响。通过确定最佳浓度的生长因子对RPE细胞的增殖进行促进,为RPE细胞的治疗提供理论依据。
方法:
1.体外RPE细胞培养:采用角膜内皮细胞去除法将RPE细胞收集,加入DMEM/F12培养基中,加入10%的胎牛血清并在37℃,5%CO2环境下培养。
2.bFGF和EGF处理:分别用不同浓度的bFGF和EGF处理RPE细胞,浓度分别为(0、1、10、20、50)ng/ml。在处理后24、48、72小时时采集细胞。
3.MTT检测:利用MTT细胞增殖试剂盒检测处理后的细胞增殖情况。
结果:
1.bFGF和EGF能促进RPE细胞增殖,且浓度依赖性明显。
2.当bFGF浓度为20ng/ml时,RPE细胞增殖最显著。
3.当EGF浓度为10ng/ml时,RPE细胞增殖最显著。
结论:
本研究表明bFGF和EGF能够促进RPE细胞增殖,且浓度依赖性明显。最佳浓度分别为bFGF20ng/ml和EGF10ng/ml。这为RPE细胞的治疗提供了重要的理论依据,有望在病理状态下通过生长因子的介入,恢复正常生理状态。
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