超顺磁氧化铁纳米粒介导bFGF转染猫角膜内皮细胞的开题报告.docxVIP

超顺磁氧化铁纳米粒介导bFGF转染猫角膜内皮细胞的开题报告

一、研究背景和意义：

猫角膜内皮细胞（CECs）具有对角膜屈光功能的维持和修复作用。在受到损伤或疾病的刺激时，CECs会释放成长因子促进其自身增生和修复。碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是一种重要的生长因子，能够促进CECs的增殖和细胞迁移，减轻角膜缺陷和超敏反应等疾病的症状。然而，传统的基因转染方法常常会受到质粒稳定性和基因转染效率的限制，需要采用更高效的转染方法。

超顺磁氧化铁纳米粒是一种具有磁性的生物纳米材料，其表面可以进行修饰，可作为载体用于基因转染和药物输送。本研究旨在探究超顺磁氧化铁纳米粒介导bFGF转染CECs的可行性和有效性，为研究角膜疾病治疗提供新的方法。

二、研究内容和方法：

1.分离和培养CECs：采用组织培养技术从猫眼球中分离角膜，并通过波士顿变性酶和胰酶消化液的混合物将角膜皮层和内皮分离。随后，用离心和再悬浮的方法纯化CECs，最后进行细胞培养。

2.超顺磁氧化铁纳米粒修饰和bFGF载体的制备：超顺磁氧化铁纳米粒通过化学法和自组装法进行修饰，制备出具有稳定性和生物相容性的纳米粒。在此基础上，结合bFGF的基因序列，构建出可用于bFGF的载体。

3.构建基因转染体系：将bFGF载体与CECs共同培养，合适的质量浓度下，观察基因转染体系的稳定性和转染效率。

4.评价转染效果：用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测基因转染体系中bFGF的表达情况，以及转染后CECs增殖的能力和迁移速度等指标。

三、预期成果和意义：

预期本研究可以通过超顺磁氧化铁纳米粒介导的基因转染方法，使bFGF更加高效地转染到CECs中。此方法可以提高传统基因转染的成功率和转染效率，为研究角膜疾病的治疗和修复提供更好的治疗方法。

本研究还可以拓展氧化铁纳米粒的应用领域，在其他生物医用材料及其它领域使用，具有广阔应用前景。