重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23诊断家畜日本血吸虫病研究的开题报告.docxVIP

重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23诊断家畜日本血吸虫病研究的开题报告

一、研究背景和意义

日本血吸虫病是由日本血吸虫寄生在牛、猪、羊等家畜体内引起的寄生虫病，是人畜共患病，给经济和人类健康带来重大威胁。目前，日本血吸虫病的流行区主要分布在我国华南、西南和华东地区，其传播范围正在逐步扩大。因此，加强对日本血吸虫病的预防和控制研究势在必行。

本研究旨在利用基因工程技术重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23，建立对家畜日本血吸虫病诊断的检测方法，为该病的早期预防和诊断提供依据。

二、研究内容和方法

1.重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23的构建

采用PCR技术从日本血吸虫基因组DNA中扩增出BSjGCP和BSj23位点的DNA序列，将其克隆到重组质粒pGEX-4T-1中，构建重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23。

2.大肠杆菌BL21（DE3）菌株的转化和重组蛋白表达

将重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23转化到大肠杆菌BL21（DE3）菌株中，利用IPTG诱导表达重组蛋白，并利用SDS和Westernblotting技术检测重组蛋白表达情况。

3.制备抗原pGEX-BSjGCP-BSj23的多克隆抗体

将重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23纯化后注射到小鼠体内，制备出抗原pGEX-BSjGCP-BSj23的多克隆抗体，利用Westernblotting技术检测抗体的特异性。

4.建立家畜日本血吸虫病诊断方法

利用ELISA技术建立抗原pGEX-BSjGCP-BSj23的诊断方法，对日本血吸虫病样本进行检测，评价检测方法的灵敏度和特异性。

三、预期成果和意义

本研究预期可以成功构建重组抗原pGEX-BSjGCP-BSj23并建立ELISA检测方法，为家畜日本血吸虫病的早期预防和诊断提供可靠的检测工具。同时，拓宽了基因工程技术在疾病诊断中的应用范围，为今后疾病诊断和治疗研究提供参考和借鉴。