酶的化学本质结构和特性公开课一等奖优质课大赛微课获奖课件.pptxVIP

酶;一、酶概念;（二）酶是生物催化剂;（3）减少反应所需活化能;例2H2O2→2H2O+O2;2．酶作为生物催化剂特殊点;转换数（turnovernumber,TNorkcat）:;（2）高专一性;（三）酶化学本质;20世纪80年代发觉一些RNA有催化活性，尚有一些抗体也有催化活性，甚至有些DNA也有催化活性，使酶是蛋白质老式概念受到很大冲击。;2．一些RNA有催化活性;;1983年美国S.Altman等研究RNaseP（由20%蛋白质和80%RNA构成），发觉RNaseP中RNA可催化E.colitRNA前体加工。;;Cech和Altman各自独立地发觉了RNA催化活性，并命名这一类酶为ribozyme（核酶），2人共同获1989年诺贝尔化学奖。;3．抗体酶（abzyme）;4．有些DNA也有催化活性;（四）酶构成;（五）依据酶蛋白分子特点将酶分成三类;二、酶命名和分类;（一）命名;（2）两个底物参与反应时应同时列出，中间用冒号（:）

分开。如其中一个底物为水时，水可略去。;2．习惯名称（recommendedname）;（二）系统分类法及编号;（三）六大类酶催化反应性质;（1）氧化酶类：催化底物脱氢，并氧化生成H2O或H2O2。;邻苯二酚氧化酶（EC1.10.3.1，邻苯二酚：氧氧化酶）;（2）脱氢酶类：直接催化底物脱氢;2．转移酶类（transferases）;3．水解酶类（hydrolases）;4．裂合酶类（lyases）;例2：;5．异构酶类（isomerase）;6．连接酶类（ligases,也称synthetases合成酶类）;（连接酶）;三、酶分离、提纯及活力测定;由于酶特殊性，在提纯过程中要注意:;环节;;（二）酶活力测定;1．测定酶活力时应注意几点;2．酶活力和比活力表示方式;习惯上沿用单位如:;（2）酶比活力（specificactivity，也称比活性）;（4）分子活性（molecularactivity）;3.酶活力测定办法;（2）荧光法（fluorometry）;（3）酶偶联分析法(enzymecouplingassay);例：测己糖激酶活性;（4）电化学法（electrochemicalmethod）;四、酶作用动力学（kinetics）;（一）底物浓度对酶反应速度影响;第一步:E+SES;2．米氏方程推导;平衡法推导：;恒态法推导：;恒态法推导要点;3．米氏方程讨论;;4．米氏常数意义;相关米氏常数阐明几点;（2）如酶能催化几个不同底物，对每种底物都

有一个特定Km值，其中Km值最小称该

酶最适底物。;5．米氏常数求法;（2）双倒数作图法（Lineweaver-Burk作图法）;（3）v对作图（Eadie-Hofstee法）;（4）[S]/v对[S]作图（Hanes-Woolf法）;（5）直接线性作图法

（Eisenthal和Cornish-Bowden法）;（二）双底物双产物反应;1．序列有序反应（orderedreactions

写作orderedBiBi）;2．序列随机反应（randomreactions，

写作RandomBiBi）;3．乒乓反应（pingpongreactions，写作uni

uniuniunipingpongorPingPongBiBi）;（三）酶浓度对酶反应速度影响;2．V与[E]关系几点讨论;（四）pH对酶反应速度影响;;酶最适pH不是一个固定常数，它受到底物种类、浓度;缓冲液种类、浓度;酶纯度;反应温度、时间等影响。;2．pH影响反应速度原因;（五）温度对酶反应速度影响;最适温度与最适pH同样，也不是一个固定常数，它随底物种类、浓度,溶液离子强度,pH,反应时间等影响。;（六）激活剂对酶反应速度影响;2.有机分子;（七）酶克制作用和克制作用动力学;2、可逆克制作用(reversibleinhibition)及其动力学;例:丙二酸对琥珀酸脱氢酶克制作用;①竞争性克制作用动力学方程推导;②竞争性克制作用动力学方程讨论;C、取方程倒数，进行双倒数作图;当[S]→很大很大;（2）非竞争性克