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真核细胞mRNA的加工(P476)5′端接上一个“帽子”(CAP)结构3′端添加PolyA“尾巴”,由RNA末端核苷酸转移酶催化mRNA的内部甲基化,N6-甲基腺嘌呤(m6A)剪接:剪去内含子(intron),拼接外显子(extron)第31页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三5′“帽子”PolyA3′顺反子(cistron)m7G-5′ppp-N-3′pAAAAAAA-OH第32页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三第33页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三EMstudiesofmRNA-DNAhybridsforthechickenovalbumingene(theR-loopingtechnique)第34页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三ProcessingofeukaryoticmRNA第35页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三第36页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三(二)RNA的拼接、编辑和再编码大多数的真核基因都是断裂基因,断裂基因的转录产物需要通过拼接,去除插入部分(即内含子,intron),使编码区(即外显子,Exon)成为连续序列,这是基因表达的一个重要环节。RNA编码序列的改变称为编辑(editing),RNA编码和读码方式的改变称为再编码(recoding)。由于存在选择性的拼接、编辑和再编码,一个基因可以产生多种蛋白质。第37页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三降钙素基因相关蛋白降钙素第38页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三RNA的拼接方式?类型I自我拼接?类型II自我拼接?核mRNA的拼接体的拼接?核mRNA的酶促拼接第39页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三(三)RNA生物功能的多样性(P489)1.RNA在遗传信息的翻译中起着决定作用。2.RNA具有重要的催化功能和其他持家功能。3.RNA转录后加工和修饰依赖于各类小RNA和其他蛋白质复合物。4.RNA对基因表达和细胞功能具有重要调节作用。5.RNA在生物进化中起重要作用。第40页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三(四)RNA的降解RNA降解是涉及到基因表达的一个重要环节,rRNA和tRNA是稳定的RNA,其更新率低;mRNA是不稳定的RNA,其更新率非常高。因为mRNA与其编码基因的表达活性直接有关,不同的RNA需要以不同的速度进行降解。AveragehalflivesofmRNAmolecules
Bacteria 1.5minutes
Vertebrates 3hours第41页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三关于核酸的生物合成第1页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三一、DNA指导下RNA的合成(一)转录的概念(二)RNA聚合酶及催化反应(三)RNA合成过程(四)启动子和转录因子(五)终止子和终止因子第2页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三DNA和RNA合成的异同基本化学机制相同:两者都由模板指导;链的延伸都有极性,即5′向3′方向;两者都用核苷5′-三磷酸(dNTP或NTP)为原料。不同方面:不需要引物;只涉及大的DNA分子中一段;只用互补双链DNA中的一条链为模板;无纠错功能。第3页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三(一)转录的概念转录是在DNA的指导下在RNA聚合酶的催化下,按照碱基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始,并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。启动子promoter终止子(terminator)模板链(templatestrand)反意义链(antisensestrand)有意义链(sensestrand)非信息区DNA5′5′3′3′第4页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图??????核心酶(α2ββ?)起始因子β?——和模板DNA结合β——起始和催化聚合反应α——酶的装配与启动子上游元件和活化因子结合全酶(αββ??)(二)RNA聚合酶及催化的反应第5页,讲稿共57页,2023年5月2日,星期三TheE.coliRNApolymeraseholoenzym
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