CCAA团体标准草案编制说明-星状病毒.docxVIP

CCAA团体标准草案编制说明 基本信息 标准草案名称 中文 水体中星状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法 英文 A method for determination of astrovirus in water ---real-time RT-PCR 项目类型 √制定 □修订 （被修订标准名称及编号：） 计划编号 2022TB037 起止时间 2022年 11月---2023 年 10月 标准起草单位 上海市徐汇区疾病预防控制中心、中华人民共和国丹东海关、拱北海关技术中心、广州海关技术中心、庄河市检验检测认证技术服务中心、北京美正生物科技有限公司、上海安合环境检测技术有限公司、国检测试控股集团辽宁有限公司。 起草组成员 刘志勇、麻丽丹、姚丽锋、周傲白雪、丁宁、朱金艳、刘磊、陶文靖、陆嘉诚、盛琳、杨军、杨希国、李丽、刘石鑫。 项目调整情况 无 背景、目的和意义 背景 水体的安全问题目前已经受到了人们的广泛关注，肠道病毒的水源性爆发是一项重大的公共卫生问题，例如人们生活中的饮用水、食品生产加工用水、水产养殖用水、污水等，这些水如果受到病毒污染，则会给人们的健康带来极大危害。肠道病毒来源广，传播途径多样，其中星状病毒的环境适应能力强，能在自然环境水体中存活很长时间，是对人类健康影响较大的污染物，已经导致了多起大规模的疾病爆发，引起了人们的广泛关注。星状病毒是最为常见的监测项目之一，通常经过被粪便污染的水或者食物传播，也是国际标准中明确需要监测的项目。 星状病毒，是一种感染哺乳动物及鸟类的病毒，核酸为单正链RNA。食源性病毒的感染剂量非常低，10-200个病毒粒子即可引起感染，在人体或者动物肠道中经过繁殖后，通过粪便污染环境，并进一步通过受粪便污染的水或者淤泥、土壤等诸多途径传播。该病毒呈世界性分布，粪-口传播，是引起婴幼儿、老年人及 免疫功能低下者急性 病毒性肠炎的重要病原之一，其致病性已日益受到重视，人类感染腺病毒主要症状是严重腹泻，伴随发热、恶心、呕吐。目前，星状病毒主要的检验方法为酶联免疫、荧光免疫、PCR方法等，由于环境样本中病毒含量非常低，病毒的检测非常困难，鉴于此，需要提高星状病毒的富集效果以及检测的灵敏度和准确度，建立一种简便易操作的水中星状病毒富集及检测方法，对水体中星状病毒污染水平实现有效监控。 目的 本标准建立“水体中星状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法”体系，包括采用阳离子膜富集小体积水和超滤方法及装置对大体积水富集回收操作，以及星状病毒实时荧光RT-PCR法。 意义 通过制定此项标准填补我国标准上的空白，为水体中星状病毒的富集和检测提供前沿、高效方法。 工作简况 标准主要起草人任务分工 刘志勇、麻丽丹、姚丽锋、周傲白雪、丁宁、朱金艳、刘磊： 对方法涉及的仪器、耗材、试剂等要求给出明确规定； 对病毒富集及检测操作流程（浓缩、洗脱、核酸提取、检测等）给出明确规定； 病毒富集、RT-PCR反应涉及的参数给出明确规定；对实时荧光RT-PCR结果判读和分析给出明确规定； 起草标准文本。 陶文靖、陆嘉诚、盛琳、杨军、杨希国、李丽、刘石鑫：方法实验室内验证和重复性实验。 主要工作过程 1.分工情况 标准起草组织工作由上海市徐汇区疾病预防控制中心牵头负责，主要工作为收集整理国内外相关标准和技术资料；制定方法验证方案、负责检测方法优化建立与验证、样品检验结果分析；组织标准起草及实验室方法可行性验证，撰写标准文本和编制说明。 2.起草阶段 2022.11-2023.10：方法验证和起草征求意见稿； 3.征求意见阶段 2023.11：征集意见和制定标准文本； 4.标准审定阶段 2023.12：标准评审和报送材料。 标准编制原则和确定标准主要内容的论据 标准编制原则 本标准为首次制定，以科学的实验数据为依据，经过科学研究而制定。本标准旨在利用实时荧光RT-PCR法实现水体中星状病毒的快速定性检测。是对、SN/T 2519-2010《贝类中星状病毒检测方法 普通PCR和实时荧光PCR方法》、SN/T 5325.5-2020《出口食品中食源性病毒定量检测 数字PCR法 第5部分：星状病毒》和部授食字第1031900874号《食品中微生物之检验方法－星状病毒之检验》的有效补充，满足了对水体终星状病毒进行检测的要求。在简化水样病毒富集处理的同时，保证了测试的准确性与可重复性，能快速测定水体中的星状病毒，提供了一种准确快速的检测方法，具有广泛的适用性。同时，本方法在编制过程中引入第三方实验室对本标准所列方法进行验证和评价，具有先进性、科学性、合理性和可操作性。 确定标准主要内容的论据 标准主要内容包括两部分，一部分为水体中星状病毒检测，需要验证方法的检出限和重复性；另外一部分需要验证CS1000plus水体自动采样富