复方丹参注射液的研制.docxVIP

复方丹参注射液的研制 根据现代药理学研究，丹参具有抑制血小板聚集、抗凝、减轻心肌缺血、重新注入病变、抗炎、提高身体免疫、减少动脉硬化和降血脂的作用。然而，药物a能改善微循环、血液流变性、抗炎、抗炎、抗铬等药物的作用。大量临床试验证实，丹参与药物a剂合用能有效治疗缺血性脑梗死、心脏病、心绞痛等缺血性血管疾病，副作用小。患者适应性好，临床实用价值高。笔者拟将丹参与药物A开发成复方丹参注射液, 以满足临床需要。丹参中有效成分达30余种, 分为脂溶性和水溶性两类。研究表明, 从丹参中分离得到的水溶性成分主要有丹参素 (丹参酸甲) 、丹参酸乙、丹参酸丙、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸C和迷迭香酸等。其中丹参素和原儿茶醛是丹参水溶性成分中的主要药效成分。笔者拟建立丹参素的质控标准, 以此评价丹参的提取工艺。 1 养血治疗,养血清心 丹参为唇形科植物 (Radix Salviae miltiorrhizae) 的干燥根及茎。其味苦、温热, 入心、肝经, 具活血化瘀、安神宁心之功效。丹参素作为丹参主要水溶性成分之一, 具有抑制血小板聚集、抗凝、扩张冠脉、改善心脏功能、抗动脉粥样硬化、抗氧化损伤和降血脂等作用。丹参制剂在制备过程中, 由于受到提取工艺的影响, 丹参中原有的丹参素等有效成分, 或提取不完全或受到破坏而损失, 达不到标准规定的限量。笔者应用高效液相的分析方法, 以提取液中丹参素含量为评价指标, 用正交实验法选择最佳提取方法。 1.1 rheodyne进样器 626高效液相泵;Alltech UVIS201紫外可见检测器;TL9000色谱工作站, Rheodyne手动进样器。丹参药材 (北京志诚堂药业有限公司) , 丹参素钠 (上海医科大学提供) , 乙醇 (分析纯, 北京化工厂) , 盐酸 (分析纯, 北京化工厂) , 氢氧化钠 (分析纯, 北京化工厂) , 去离子水 (北京大学医学部) 。 1.2 丹参材料的前处理 1.2.1 不同投料生药材后人参素的回收试验结果 笔者将药材分别以根茎、饮片及粗粉 (过30目) 各10g, 加水煎煮3次, 合并3次煎液测定丹参素的累积煎出量, 并计算累计煎出丹参素量与投料生药材的比例, 试验结果见表1。 由表1可知, 未经处理的丹参原药材经3次水煎煮, 丹参素的累计煎出量明显少于饮片和粗粉的累计煎出量;饮片与粗粉的累计煎出量未见明显差异。药材饮片易得, 不需处理, 且丹参素提取量与粉碎后的丹参粗粉无明显差异。笔者根据试验结果选择饮片的方式进行投料, 在工业生产规模时, 可根据生产成本及设备选择相适应的药材预处理方式。 1.2.2 正交试验设计 笔者通过正交试验法, 对丹参的提取工艺开展研究, 研究因素包括加水量、提取时间和提取次数, 各因素的水平数见表2。根据筛选的试验因素及水平数, 以提取液中丹参素含量作为评价指标, 选择L9(34) 表头设计各组试验。各试验方案见表3。煎液合并, 过滤, 滤液浓缩成每毫升含原药材1g, 正交筛选试验结果见表4。 结果表明最佳工艺条件为:A2B2C3, 各因素对提取方法的影响程度依次为CAB, 按筛选出的最佳工艺条件重复3次试验。试验结果见表5。试验结果表明, 取丹参药材以10倍量水煎煮3次, 每次1.5h, 提取液中丹参素含量较高, 该工艺经验证试验证明稳定可行。 1.3 提取丹参溶液，消除各种疾病 1.3.1 醇沉过程中人参素含量的变化 利用水与乙醇的溶解性能不同, 水煎液用乙醇沉淀法可将其大部分杂质除去, 此方法为中药提取时常用的方法。药材水煎液成份十分复杂, 在浓缩水煎液中, 加入一定量的乙醇, 不溶于冷乙醇的成份如淀粉、树胶、粘液质、糖类和蛋白质等从溶液中沉淀析出, 滤过除去, 达到除杂目的。笔者将丹参提取液合并, 过滤, 滤液浓缩成每毫升含1g生药材, 加入95%乙醇, 使含醇量达60%, 0℃~4℃静置48h后滤过, 滤液浓缩至相对密度为1.20~1.25。浓缩后滤液加入95%乙醇, 使醇浓度分别为60%、70%和80%, 0℃~4℃静置48h后滤过, 滤液回收乙醇, 并浓缩至无醇味。笔者分别测定各醇沉后滤液中丹参素含量, 考察不同二次醇沉浓度对丹参素含量的影响, 结果见表6。根据试验结果, 随着第二次醇沉时乙醇浓度的提高, 杂质沉淀量相应增加, 但丹参素含量也相应降低。兼顾除去杂质和尽量减少丹参素损失这两方面要求, 笔者选择第二次醇沉的浓度为70%。 1.3.2 正交试验筛选 为充分破坏丹参提取液中的鞣质、蛋白质及不稳定成分, 同时提高有效成分丹参素的含量, 进一步对提取液进行酸碱处理, 并拟定各因素水平, 开展正交试验研究。试验因素水平见表7, 正交L9(34) 各试验方案见表8。 取经醇沉处理后滤液200mL, 用1mol/L NaOH溶液分别