大鼠少突胶质细胞的分离培养与定向诱导分化的中期报告.docxVIP

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2023-10-20 发布于上海
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大鼠少突胶质细胞的分离培养与定向诱导分化的中期报告.docx

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大鼠少突胶质细胞的分离培养与定向诱导分化的中期报告本次实验的目的是分离培养大鼠少突胶质细胞，并进行定向诱导分化。目前实验已经完成了中期的进展，以下为详细报告： 1. 分离培养大鼠少突胶质细胞我们采用了瓜氏酶/胰酶消化法来分离大鼠少突胶质细胞。具体步骤如下：（1）将新鲜取得的大鼠脑组织放入PBS缓冲液中，并去除血管和膜组织。（2）将清洗后的脑组织切成小块，加入预处理好的瓜氏酶/胰酶酶液中，用离心机将细胞混合物离心，倒掉上清液。（3）加入DNase I消化酶液，使细胞混合物更加易于分散。（4）用20％BSA溶液洗涤细胞混合物，过滤细胞混合物，获得单一的细胞悬浮液。用细胞培养基进行细胞计数。（5）将细胞悬浮液在35mm培养皿中培养，并加入1％PS以避免细胞污染。（6）在培养皿中加入分化因子，使细胞向神经元或胶质细胞方向分化。 2. 定向诱导分化目前我们已经成功地对分离出的大鼠少突胶质细胞进行了定向诱导分化。具体步骤如下：（1）利用LIF因子诱导培养细胞形成悬浮球。（2）将悬浮球放置在无血清的培养基中，加入FGF-2和分化因子BMP-4。（3）持续培养至细胞定向分化为神经干细胞或神经元，验证分化介质的效果。 3. 结论目前实验已经完成了大鼠少突胶质细胞的分离和定向诱导分化。实验结果良好，我们现在正在进一步研究细胞分化和应用。