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《分子生物学综合实验》课程教学大纲 一、课程概况 课程中文 分子生物学综合实验 名称 课程英文 Comprehensive experiment for Molecular biology 课程编号 名称 课程类别 □公共必修课 □公选课 □院级限选课 √学科基础课 □专业基础课 □专业限选课 □专业任选课 总学时 48 讲授学时 0 实验学时 48 总学分 3 开课单位 农学院 开课系 生物技术系 授课对象 生物技术专业 先修课程 分子生物学 执笔人 审核人 审批人 修订时间 二、课程简介 90 年代初期，随着分子生物学日新月异的发展，分子生物学实验技术已成为生命科学各学科重要 的研究工具。 因而成为生物科学工作者必需掌握的技能之一。分子生物学是研究蛋白质、核酸等大 分子的结构和功能，阐明生命现象和生物学规律的一门新兴学科。分子生物学的理论和方法已在生命 科学、医学和工农业生产等各个领域里得到广泛应用。本课程是生物技术专业的学科基础课。分子生 物学和基因工程系统知识的学习也为细胞工程、发酵工程、酶工程课程提供理论和技术基础。 三、课程性质 本课程为专业基础实验课。分子遗传学、分子生物学、基因工程综合实验在生命科学的发展中起 着非常重要的基础作用，它与农业、林业、食品、医药和环保等领域都有着十分广泛而又密切的联系， 并且已成为生命科学研究中的最基础手段之一。因此，生物化学实验技术是大学本科生物类、农学类、 园林类、食品类等专业的必修实验课程。生物化学实验技术课程主要是培养学生在分子生物学方面的 实践能力和创新能力。它的作用帮助学生加深理解与掌握分子生物学和基因工和的理论知识，而且是 培养学生将分子生物学知识应用于生产实践，提高学生的动手操作能力，提高在实践中发现、分析和 解决问题的能力，提高开拓创新精神的有效途径。 四、实验教学目标 使学生掌握基本的生化与分子生物学实验技术，提高学生分析问题解决问题的能力，为即将进行 227 的本科毕业论文以及今后独立进行科学研究和在相关生物技术工作时打下良好的基础。 通过学习分 子生物学大实验，要求学生熟练掌握以下分子生物学实验技术：PCR 扩增、质粒DNA 提取酶切、胶 回收纯化DNA 、DNA 体外重组（DNA 酶切、连接反应）、细菌感受态的制备、细菌转化、阳性克隆 的筛选、RNA 的提取及RT-PCR 等技术。 在实验过程中，要求学生认真预习实验讲义，上课亲自动 手操作，做好实验记录，实验结束后详细整理、统计、分析实验结果。培养端正的科研态度和独立思 考解决问题的能力。 五、理论教学内容及要求 无。 六、实验教学内容及安排 实验1 大肠杆菌质粒DNA 的提取（4 学时） 实验目的：掌握大肠杆菌质粒DNA 的提取的原理及方法。 实验内容：大肠杆菌质粒DNA 的提取。 实验要求：用碱裂解法提取质粒 DNA ，要求每个学生一组，掌握实验的原理、试剂的配制及提 取质粒中各试剂的作用。要提取到质粒DNA 。供下次实验用。 实验2 质粒的酶切、电泳、核酸定量。（4 ） 实验目的：质粒的酶切，电泳，质粒的定量。 实验内容：用限制性内切酶酶切提取的质粒，电泳检测质粒和酶切质粒，并用微量分光测定质粒 的浓度。 实验要求：要求每个学生一组，电泳检测到质粒与酶切的质粒，测定质粒的浓度，完成实验报告。 要求学生掌握如何酶切DNA ，DNA 定量的方法和原理。 实验3 水稻基因DNA 的提取（4 ） 实验目的：提取水稻基因组DNA 。 实验内容：用CTAB 法提取水稻基因组DNA 。 实验要求：要求要求每个学生一组，要提取到水稻基因组DNA 。 实验4 水稻DNA 的定量、PCR 扩增 实验目的：对水稻DNA 进行定量，进行PCR 。 228 实验内容：用λ DNA 对水稻DNA 进行定量，用肌动蛋白引