基于DNA环调控的rrnB P1嵌合启动子表达载体的构建及应用的中期报告.docxVIP

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2023-08-25 发布于上海
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基于DNA环调控的rrnB P1嵌合启动子表达载体的构建及应用的中期报告.docx

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基于DNA环调控的rrnB P1嵌合启动子表达载体的构建及应用的中期报告 DNA环调控与基因表达调控密切相关，它是细胞适应环境变化和维持稳态的重要机制之一。本项目旨在构建一种基于DNA环调控的rrnB P1嵌合启动子表达载体，并利用其在大肠杆菌中进行基因表达调控的研究。在实验中，我们首先设计合成了不同长度的DNA环片段，并利用PCR技术将它们嵌合到rrnB P1启动子上，形成了一系列带有DNA环的启动子片段。随后，利用限制性内切酶和连接酶等方法，将目标启动子片段克隆进入表达载体pET28a中。为了验证该载体的功能，我们选择了一种模型蛋白质进行了表达实验。结果表明，在添加不同浓度的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）后，该载体可实现对目标基因的不同水平表达调控。此外，通过Western blot和SDS等技术进行检测，我们发现该载体能够有效表达目标蛋白，证明了其在大肠杆菌中进行基因表达调控的可行性。总体而言，本项目初步验证了基于DNA环调控的rrnB P1嵌合启动子表达载体的可行性、稳定性及表达效果，并为下一步相关研究提供了基础实验数据。