SN_T 4534.1-2016商品化试剂盒检测方法 黄曲霉毒素M1 方法一.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4534.1—2016商品化试剂盒检测方法黄曲霉毒素M，方法一Commercial kit methodAflatoxin M,--Test method I2016-06-28 发布2017-02-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局话4conw315.刮涂层查真伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准商品化试剂盒检测方法黄曲霉毒素 M，方法1SN/T 4534.1--2016*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×12301/16印张 0.5字数 10 千字2017年2月第一版2017年2月第一次印刷印数1-1100*书号：155066·2-31189 SN/T 4534.1--2016前言本部分为SN/T4534商品化试剂盒检测方法黄曲霉毒素Mi的第1部分本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、深圳市检验检疫科学研究院、合肥工业大学、南京卫岗乳业有限公司。本部分主要起草人：薛峰、钱志娟、王毅谦、蒋原、陈伟、毕思远、蔡宝亮、李东明、曾德新、刘小军、吴卫东。I SN/T 4534.1—2016商品化试剂盒检测方法黄曲霉毒素M，方法一1范围SN/T4534的本部分规定了纯牛奶中黄曲霉毒素MI残留量的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中黄曲霉毒素M1残留进行筛选检测。0规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的黄曲霉毒素M，与检测线上的黄曲霉毒素M1抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中黄曲霉毒素M1 的含量定性判定。4试剂与材料4.1黄曲霉毒素 M 检测试剂盒本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录 A。商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下：黄曲霉毒素Mi 检测试纸条；a）ib）微孔试剂（主要成分为胶体金标记的黄曲霉毒素M抗体）。4.2试剂黄曲霉毒素 M 对照品。5仪器设备5.1温育器:40℃±2℃。5.2便携式读数仪：测量波长：525nm，带宽土8nm，波长准确度士3nm。计算方式：峰面积分析，并可计算检测线峰面积/控制线峰面积比值。1 SN/T 4534.1—20165.3移液器:200 μL。6样品制备检测前样品需充分混匀。7分析步骤7.1将温育器温度设定为40℃;吸取200 μL样品于微孔中，5～10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育器中温育 8 min。7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育6.min。7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。7.4检验完毕，余下的测试条密封好放到试剂盒中,2℃～8℃保存。结果判定8通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变化，需在 5 min 内进行结果判定。a）目视结果判定依据（如图1.所示)：1）无效：控制线（C线）不显色。2）阴性：检测线（T线)颜色比控制线（C线)颜色深或者强。3）弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当。4）阳性：检测线（T线）不显色，或检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色浅或者弱。1325吸水纸控制线IC膜黄曲霉素M,检测线海绵端试纸条示意图空白试纸无效阴性弱阳性阳性图 1 目视判定示意图b）通过便携式读数仪对试纸条读值，并依据下列方式进行判定：1）阴性:读数数值1.1,则判为阴性。2）弱阳性：0.9≤读数数值≤1.1，则判为弱阳性；需要重新检测,若结果依然为弱阳性，则判2 SN/T 4534.1—-2016定为阳性；若结果为阴性，则判定为阴性。3）[阳性：读数数值0.9,则判为阳性。9方法性能指标9.1检出限0.4 μg/ kg.9.2特异性当浓度≤100 μg/kg 时，磺胺类、喹诺酮类、β-内酰胺类、四环素类四大类药物均无交叉反应。 9102-SN/T 4534.1—2016附录A（资料性附录）L/NS牛乳中黄曲霉毒素M，快速检测试纸条评价结果1)A.1　检出限0.4 μg/kg