SN_T 3934-2014出口食品中霉菌的霍华德计数方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3934-—2014出口食品中霉菌的霍华德计数方法 Method of Howard mold counting in export food2014-11-01实施2014-04-09 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3934—2014前言本标准是依据GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山西出人境检验检疫局、中华人民共和国顺德出人境检验检疫局。本标准主要起草人：张敏爱、张建军、苑利、李卫华、范媛媛、翟金义、姚亚婷、王春霞、王东斌。 SN/T 3934--2014出口食品中霉菌的霍华德计数方法1范围本标准规定了出口食品中霉菌的霍华德直接镜检计数方法，本标准适用于果蔬及其制品（包括水果、原浆果汁、果酱、水果罐头、番茄汁、番茄酱、茄汁类罐头等）、粉状调味品（主要指辣椒粉、胡椒粉、大蒜粉、姜粉)的霉菌计数。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注且期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3设备和材料除微生物实验室常规设备外，其他主要设备和材料如下：显微镜：100×～ 400×。3.1匀浆器:5 000 r/min～15 000 r/min。3.2磁力搅拌机。3.3抽滤装置。3.43.5天平:感量 0.1 g。大容量离心机:5 000 r/min～15 000 r/mina3.63.7折光仪。真体参见附录B中 B.1。霍华德计数玻片（郝氏计测玻片）：具有标准计测室的特制玻片3.83.9锥形底离心管：50 mL。3.10恒温水浴箱。标准筛：规格Φ150μm；Φ380.tm3.114培养基和试剂除有特殊说明外，所有实验用试剂均为分析纯；实验用水符合GB/T6682-—2008中二级水的要求。稳定液：0.5%的羧甲纤维素纳：见A.1。4.14.2 1%的 NaOH溶液:见 A.2。4.3消泡剂:2-辛醇。5 检验程序5.1检样的制备固体样品5.1.1调味粉称取10.0g样品，加入1%的NaOH溶液200mL，13000r匀浆2min，刮下粘在匀浆器壁上的组1 SN/T 3934-2014分，再匀浆 3min。滴加 2-辛醇2滴～3滴消除泡沫（可根据需要适当补加）。取混合物 10.0 g，用稳定液调至折光指数为1.3374～1.3388(20℃，可溶性固形物约为3%～4%），备用。水果称取至少50g样品，8000r勾浆5min,取匀浆后的样品10.0g，用稳定液调至折光指数为1.3447～1.3462(20℃，可溶性固形物约为8%～9%），备用。蔬菜称取至少50g样品，8000r匀浆5min，取匀浆后的样品10.0g，用稳定液调至折光指数为1.3374～1.3384(20℃，可溶性固形物约为3%～4%），备用。5.1.2半固体（酱状)样品原味制品称取至少50g样品，5000r匀浆2min，取匀浆后的样品10.0g，参照和用稳定液调节折光指数，以水果为原料的制品调至1.3447～1.3462(20℃，可溶性固形物约为8%～9%）；以蔬菜为原料的制品调至1.3374～1.3384（20℃，可溶性固形物约为3%～4%），备用。调味制品称取至少50g样品，5000r勾浆2min，取匀浆后的样品10.0g，用稳定液调至折光指数为1.3794～1.3812(20℃，可溶性固形物为29%～30%），备用。5.1.3液体样品（原浆果汁）充分混匀，量取 50 mL至离心管中。2200r离心10min，弃去上层液体（动作要轻,不要破坏下层沉淀）,加水至10mL，用稳定液调至折光指数为1.3447～1.3462（20℃，可溶性固形物约为8%～9%）,备用。5.1.4固液混合物果蔬罐头开罐，内容物过$380μm（40目）的标准筛沥干水分20min，筛上物参照和处理后备用。茄汁鱼罐头穿刺放气，置于90℃～95℃热水浴中至油脂完全融化。开罐，内容物过Φ150μm（100目)的标准筛至大部分汁液和油通过，将筛下物充分混匀，取50ml至离心管中，2400r离心20min，弃去上层液体（油和水），剩余试样参照处理后备用。5.2操作步骤5.2.1霍华德计数玻片的检查清洁霍华德计数玻片，使盖玻片与载玻片之间产生牛顿环。具体参见B.2。5.2.2加样用玻璃棒取部分预先制备好的样品至中心计测室，均匀涂开。盖上盖玻片使分布均匀。检测用量2 SN/T 3934--2014以正好覆盖计测室边缘为宜。当样液涂布不均匀、样液流人沟内或者从盖玻片与突肩处流出等，则弃去重新制备。5.2.3视野校正将制备好的玻片置于显