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S 65.10017NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2061.32012农药室内生物测定试验准则植物生长调节剂第3部分:促进/抑制生长试验黄瓜子叶扩张法Pesticide guidelines for laboratory bioactivity tests- Part 3: Cucumber cotyledon expansion test for promotion or inhibitionactivities of plant growth regulators012-12-24发布2013-03-01实施中华人民共和国农业部3发布 NY/T 2061.3-2012言前NY/T2061《农药室内生物测定试验准则植物生长调节剂》为系列标准:第1部分:促进/抑制种子萌发试验浸种法;-第2部分:促进/抑制植株生长试验茎叶喷雾法;第3部分:促进/抑制生长试验黄瓜子叶扩张法;第4部分:促进/抑制生根试验黄瓜子叶生根法。本部分为《农药室内生物测定试验准则植物生长调节剂》的第3部分。本部分按照GB/T1.1给出的规则起草。本部分由农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位:农业部农药检定所、浙江化工研究院。本部分主要起草人:张宏军、陈杰、张佳、张文君、周欣欣、聂东兴、张静。 NY/T 2061.3--2012农药室内生物测定试验准则植物生长调节剂第3部分:促进/抑制生长试验黄瓜子叶扩张法1范围本部分规定了黄瓜子叶扩张法测定细胞分裂素类植物生长调节剂促进离体组织细胞分裂和扩张能力试验的基本方法和要求。本部分适用于农药登记用细胞分裂素类植物生长调节剂活性测定的室内试验和评价。2仪器设备2.1人工气候箱:光照强度01x~100001x,温度10℃~50℃,湿度50%~95%。或能达到以上光照强度、温度、湿度要求的可控日光温室。2.2恒温培养箱:温度10℃~50℃。2.3叶面积测定仪:扫描式,分辨率0.1mm。2.4电子天平:感量0.1mg。2.5带盖糖瓷盘(长30cm,宽20cm)、烧杯(500mL以上)、移液管或移液器、培养血(直径9cm)、定性滤纸(直径9cm,中速)、剪刀、记号笔等。3试验材料3.1生物试材黄瓜(Cucumis sativus L.)子叶。3.2试验药剂采用原药(或母药)或制剂,并注明通用名称、含量、生产厂家、生产日期、批次和有效期。3.3对照药剂采用已登记注册且生产上常用的原药(或母药)或制剂,其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4试验步骤4.1试材准备选取籽粒饱满、大小一致、未经包衣处理的黄瓜种子若干,用0.1%氯化汞溶液表面消毒10s后用蒸馏水洗净,用蒸馏水浸种8h。洗净后播在盛有含0.7%水琼脂培养基的带盖塘瓷盘内,琼脂厚度1.5cm,置于(28士1)℃的人工气候箱或恒温培养箱暗培养72h。选取子叶完全形成但还未展开的黄瓜幼苗,在子叶下方1mm处剪下子叶,并将两片子叶分开,选择大小均匀的完整子叶放入盛有300mL蒸馏水的烧杯中备用。4.2溶液配制水溶性原药用含0.1%吐温-80表面活性剂的蒸馏水溶解;其他原药选用合适的有机溶剂溶解,用含0.1%吐温-80表面活性剂的蒸馏水稀释;制剂直接加蒸馏水稀释。试验药剂和对照药剂各设5个~7个系列浓度。4.3药剂处理1 NY/T2061.3-—2012在培养Ⅲ内铺2张定性滤纸,每Ⅲ均匀摆放10片准备好的黄瓜子叶,子叶正面朝下。用移液管或移液器在各培养血中加人不同浓度的药液9mL,加盖后置人温度(28土1)℃、湿度70%以上、连续光照30001x的人工气候箱内培养72h。每处理至少4次重复,并设等量蒸馏水空白对照处理。4.4调查培养处理后72h取出黄瓜子叶,用吸水纸吸于黄瓜子叶表面的水分,测量每片子叶面积,称量每片子叶的鲜重。5数据统计与分析5.1计算方法黄瓜子叶生长促进率或抑制率按式(1)计算,计算结果保留小数点后两位。R=IXX 1×100(1)X式中:R生长促进率或抑制率,单位为百分率(%);X—一处理黄瓜子叶面积或鲜重,单位为平方毫米或毫克(mm²或mg);X。----对照黄瓜子叶面积或鲜重,单位为平方毫米或毫克(mm²或mg)。5.2统计分析应用标准统计软件(如:SAS、SPSS等)对子叶面积和鲜重促进或抑制率的几率值和药剂浓度的对数建立回归方程,计算FClo、ECso及95%置信限。6结果根据结果进行分析、评价,写出正式试验报告,并列出原始数据。2 中华人民共和国农业行业标准农药室内生物测定试验准则植物生长调节剂第3部分:促进/抑制生长试验黄瓜子叶扩张法NY/T2061.3—2012***中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)网址: )(邮政编码:100125北京昌平环球印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销*??开本
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