SN_T 0670-2012出口食品中泰乐菌素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

T中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0670—2012代替 SN 0670—1997出口食品中泰乐菌素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of tylosin residues in food for export---LC-MS/MS2012-05-07 发布2012-11-16 实施中华人民共和国发布数码防伤国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0670-2012前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准代替SN0670一1997《出口禽蛋中泰乐菌素残留量检验方法杯碟法》。本标准与 SN0670-1997相比，主要技术内容变化如下：-修改了标准名称；删去了抽样部分。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。本标准主要起草人：谢文、丁慧瑛、钱艳、奚君阳、蔡靖毅。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN 0670--1997.I SN/T 0670--2012出口食品中泰乐菌素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了食品中泰乐菌素残留量的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于虾、猪肉、猪肝、猪肾、蛋和牛奶中泰乐菌素残留量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。3方法提要用甲醇提取样品中残留的泰乐菌素，C18固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.1　乙腈:色谱级。4.2甲醇：色谱级。4.3甲酸：色谱级。4.4正已烷：色谱级。4.5氢氧化钠。4.6 磷酸二氢钠。4.70.1mol/L氢氧化钠溶液：称取 4g氢氧化钠，并用水稀释至1L。4.8甲醇水溶液：甲醇-水(2+8,体积比）。4.9磷酸盐缓冲溶液：称取13.8g磷酸二氢钠,溶解于950mL水中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液 pH 至 8.0,最后用水稀释至 1 L。4.10泰乐菌素酒石酸盐标准品（Tylosin tartrate，CAS号：74610-55-2,Cs。H3NO23）：纯度大于或等于 95% 。4.11泰乐菌素标准储备溶液：称取经折算适量标准品（4.10），用甲醇溶解，溶液浓度为100 μg/mL，0℃～4℃冷藏避光保存。有效期3个月。4.12标准工作溶液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成10ng/mL、12.5ng/mL、25ng/mL、75ng/mL、125 ng/mL的标准工作溶液，相当于样品中含有20 μg/kg、25μg/kg、50 μg/kg、150μg/kg、250 μg/kg泰乐菌素。4.13Ci:固相萃取小柱,500 mg,或相当者，使用前依次用5 mL 甲醇、5 mL水和5 mL磷酸盐缓冲溶1 SN/T 0670—2012液预洗。4.14有机相微孔滤膜：0.45μm。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2分析天平：感量0.1mg，0.01g。5.3固相萃取装置。5.4离心机:4 000 r/min 和 7 000 r/min。5.5 pH计。5.6 涡旋混合器。5.7氮吹仪。5.8均质器。5.9旋转蒸发器。6试样制备与保存6.1虾、猪肉、猪肝、猪肾从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃以下冷冻存放6.2蛋从所取全部样品中取出有代表性样品250mL，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样于0℃～4℃保存。6.3牛奶从所取全部样品中取出有代表性样品约250mL，均分成两粉，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样于 0℃～4C保存。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化７ 测定步骤7.1　提取7.1.1 虾、猪肉、猪肝、猪肾样品称取5g试样(精确到0.01g)置于50mL具塞离心管中，加20mL乙腈，在均质器中以12000r/min均质30 s；于3000r/min离心5min，将上层乙睛提取液转移至50 mL容量瓶中，在样品残渣中再加20mL乙腈，重复上述操作，合并乙睛提取液，加乙腈定容至50mL。移取10.0mL乙腈提取液，加人30mL乙腈饱和的正已烷于旋涡混合器上以2000r/min，混匀1min，以4000r/min离心3min,