SN_T 4532.5-2017商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法五.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4532.5—2017商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类方法五Commercialkit testmethodBeta-lactams-Test method V2017-07-21发布2018-03-01实施中华人民共和国发布3O国家质量监督检验检疫总局 SN/T4532.5—2017前言本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类》的第5部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本部分主要起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、北京博欧实德生物技术有限公司。本部分主要起草人：聂丹丹、罗雁非、刘金华、郑晶、刘阳、曲辉、彭勃、王宁、芦春梅、邹明强、牟峻， SN/T4532.5—2017商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类方法五1范围SN/T4532的本部分规定了牛奶中β-内酰胺类和四环素类药物残留的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对牛奶中β-内酰胺类和四环素类药物残留的定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理该方法基于胶体金免疫技术，试纸条结合垫包被有检测物抗体胶体金复合物，检测线包被有检测物抗原，当样品中含有检测物时，会与检测线包被抗原竞争结合金标复合物，通过检测线与控制线颜色深浅比较，来实现对样品中待测物含量的定性判断。4试剂与材料4.1β-内酰胺类/四环素类四联检测试剂盒1）：参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。4.2商品化试纸条、反应杯及反应试剂在0℃～7℃、干燥、避光条件下保存。4.3试剂盒组成如下：a）检测条；b)阳性质控；c)阴性质控。51仪器设备5.1温育器：56℃±1℃。5.2读数仪。5.3移液器：可调量程至300μL。1）北京博欧实德生物技术有限公司产品，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。1 SN/T4532.5—20176样品制备检测前样品需充分混匀。7分析步骤7.1将温育器恒温至56℃±1℃。7.2将检测条放置在温育器的槽中，在检测条上标记样品编号。撕开检测条上的封膜至指示线处，侧的凹槽中，再将封膜盖回。7.3用移液器取300μL牛奶样品，竖直缓慢滴加至检条两侧任首7.4盖上温育器盖，温育器自动开始8min倒计时，温育结束后，蜂鸣器响起，打开塑料盖，取出检测条。7.5目视或通过读数仪判读结果8结果判定8.1目视判定目测对比质控线（C)和检测线（BL/TE)的色差。阳性：两条检测线中有一条或者两条颜色均浅于质控线，或检测线未出现。阴性：检测线颜色与质控线相当或深于质控线无效：质控线未出现或模糊不均匀，说明结果不可用，需要重新进行检测。8.2读数仪结果读取及分析将检测条插人仪器的读数室，按回车键读数，约8s后，显示结果出现“NEGTIVE”字样为阴性结果，出现“POSITIVE”字样为阳性结果9方法性能指标9.1检出限μg/kg；头孢氨：30μg/kg；头孢洛宁：阿莫西林：4μg/kg；氨芊西林：4μg/kg；头孢乙腈：125μg/kg；头孢唑林：8μg/kg；头孢哌酮：4μg/kg；头孢喹：20μg/kg；头孢噻呋：10μg/kg；头孢呋：5μg/kg；头孢匹林：4μg/kg；邻氯青霉素：30μg/kg；双氯青霉素：30μg/kg；青霉素G：2μg/kg金霉素：50μg/kg；土霉素：75μg/kg；四环素：10μg/kg。9.2特异性当浓度100μg/kg时，氟苯尼考、林可霉素、阿维菌素、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、氯霉素、克伦特罗、喹嗯啉-2-羧酸、二氯二甲吡啶酚、去甲基金霉素、甲烯土霉素、强力霉素均无交叉反应。当浓度100μg/kg时伊维菌素、林可霉素、丹诺沙星、喹嗯啉-2-羧酸、2卤2甲吡啶酚、去甲基金霉素、甲烯土霉素、强力霉素出现交叉反应。2 SN/T4532.5—2017附录A（资料性附录）牛乳中β内酰胺类和四环素类快速检测试纸条评价结果2)A.1检出限检出限见表A.1。表A.1检出限药物名称检测限范围/（μg/kg）验证浓度水平/（μg/kg）阿莫西林（Amoxicillin）2.5~4.044氨苄西林（Ampicillin）2.5~4.012 6~12头孢乙腈（Cefacetrile）头孢氨苄（Cefalexin）15~30303~55头孢洛宁（Cefalon