化疗对乳腺癌患者外周血淋巴细胞亚群及CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的影响.pdfVIP

化疗对乳腺癌患者外周血淋巴细胞亚群及 + + - CD4CD25CD127调节性T细胞的影响 康文喜 樊 静 河北省秦皇岛市第四医院 邮编：066001 摘要： 目的探讨化疗对乳腺癌患者外周血 CD4+CD25+CD127-调节 性T 细胞及T 、B 、NK 淋巴细胞亚群的动态变化及其临床意义。方法 采用流式细胞仪术分析 129 例乳腺癌患者CD4+CD25+CD127-调节性 T 细胞水平及CD3 、CD4、CD8、NK 、B 细胞和CD4/CD8 比值的动 态变化，并进行化疗前后、组织类型和TNM 分期的对比分析。结果 化 疗后乳腺癌患者 CD4+CD25+CD127-调节性T 细胞比率降低，CD3 、 CD4、CD4/CD8 值增高，CD8 、NK 和 B 细胞亚群降低 ；调节性T 细胞的数量与临床分期和组织分化程度有关。 结论 乳腺癌患者化疗 后的免疫调节抑制功能下降，免疫功能得到提高，但体液免疫及 NK 功能未见提高。 关键词 乳腺癌 化疗 CD4+CD25+CD127-调节性 T 细胞 流式细 胞术 目前化疗是乳腺癌的主要治疗手段，也是规范化治疗的重要组成 部分。由于化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时，也会损害正常细胞包括 + + 免疫细胞，从而影响患者的免疫功能。CD4CD25调节性 T细胞 （T regulatory cell，Treg）是体内重要的抑制性免疫调节 T细胞，正 常情况下主要参与维持免疫稳定，抑制自身免疫疾病的发生；在肿瘤 [1] 免疫耐受机制中发挥关键的作用 。本文通过检测乳腺癌患者化疗前 + + - 后外周血CD4CD25 CD127调节性T细胞及T淋巴细胞各亚群变化， 分析化疗对机体免疫功能的影响，探讨 Treg与肿瘤及临床转归的关 联性,为乳腺癌的治疗提供新的理论依据。 1.1 研究对象 本组129例均为我院2009年2月-2010年12月经病理确诊的手术后乳腺癌患 者，年龄27~65岁，平均年龄（41.23±6.71）岁，无自身免疫疾病，治疗前未使用过任何免 疫调节剂和免疫抑制剂等影响免疫功能的药物。 1.2 主要试剂及仪器 流式细胞仪—EPICSXL为美国BECKMANCOULTER公司产品。CD3-PC5、 CD4-FITC、CD8-PE、CD19-FITC、CD16-FITC、CD56-PE、CD3-PC5、CD4-PC5、CD25-FITCCD127-PE 荧光标记单克隆抗体、同型对照IgG1或IgG2荧光抗体、红细胞裂解液等试剂均为美国贝克 曼库尔特（BECKMAN COULTER）公司出品。 1.3实验方法 所有观察对象均于化疗前 1天，化后 1周清晨空腹抽取静脉血2ml，EDTA-2K 抗凝，使用直接免疫荧光标记法标记细胞并进行流式细胞仪分析。操作步骤：取不同荧光标 记的单克隆抗体各20μ l分别加入100μ lEDTA-2K抗凝的外周血，室温下孵育15分钟，再 加入红细胞裂解液孵育10分钟，离心1500转/5分钟，加入PBS2ml洗两次，弃上清后加入 适量的PBS，混匀后上机检测。 1.4.化疗药物：采用紫杉类+蒽环类联合化疗。 1.4统计学处理 实验结果应用SPSS13.0统计分析软件，采用t检验进行统计学分析，统计学 差异确定为 p＜0.05。 2.结果 + + - + 2.1 乳腺癌患者化疗前后 CD4CD25CD127/CD4T比率变化（见表 1）：化疗前患者调节性T 细胞比率为4.65±1.38,化疗后调节性T细胞为2.43±1.06，检测结果显示化疗后调节性T 细胞水平较化疗前明显降低，差异具有统计学意义。 表1. 化疗前后调节性T细胞比率变化 + + - + 分析对象 n CD4CD25CD127/CD4T % 化疗前患者 129