SNT 1763.3-2006出入境口岸生物毒素检验规程 第3部分：蓖麻毒素.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1763.3—2006出入境口岸生物毒素检验规程第3部分：麓麻毒素Examination codes for biological toxin at entry-exit port-Part 3: Ricin2006-04-25发布2006-11-15 实施中华人民·共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1763.3—2006前言SN/T1763《出人境口岸生物毒素检验规程》共分为三个部分：-第1部分：肉毒毒素；-第2部分：金黄色葡萄球菌肠毒素B;一第3部分：麻毒素。本部分是SN/T1763的第3部分。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分由中华人民共和国广东出入境检验检疫局负责起草，军事医学科学院微生物流行病研究所全军微生物检验研究中心参加起草。本部分主要起草人：潘德观、雷达、康琳、王凝岚、邓红樱、王景林、闫剑勇。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1763. 3--2006出入境口岸生物毒素检验规程第3部分：葩麻毒素1范围SN/T1763的本部分规定了在出人境口岸对非临床来源样品检验葩麻毒素的程序和方法。本部分适用于在出入境口岸对可疑食品、水源和土壤及其他可疑污染物等非临床来源样品进行葩麻毒素现场快速检验与实验室检验。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T1763的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本部分。GB19489--2004　实验室　生物安全通用要求SN/T1763.1—2006出人境口岸生物毒素检验规程肉毒毒素WS233—2002微生物和生物医学实验室生物安全通用准则3术语和定义SN/T1763.1—2006确立的以及下列术语和定义适用于SN/T1763的本部分。3. 1麓麻毒素ricin篦麻籽中含有的一种具细胞毒性作用的高毒性蛋白质。4实验室生物安全要求4.1实验室应按照GB19489—2004和WS233—2002对生物安全2级(BSL-2)实验室的生物安全要求执行。4.2使用过的实验用品应按照GB19489--2004对废弃物进行无害化处理。5 检验对象—-液体样品;一固体或半流动体样品；一地表面及物体表面样品；一草等植物样品。6 设备Ⅱ级生物安全柜、高压蒸汽灭菌器、普通冰箱、普通台式离心机(带密封的离心安全杯)、冷冻离心机（带密封的离心安全杯）、普通恒温培养箱、恒温水浴箱、酶标仪、洗板机。1 SN/T 1763. 3--2006样品制备应按照SN/T1763.1—2006中7.1～7.4的规定进行。8 检验程序8.1胶体金免疫层析方法为初筛检验方法,ELISA定性试验为确认方法。8.2初筛试验和确认试验可同时进行。确认试验结果是最终判定结果的依据。9检验方法9.1胶体金免疫层析试验本试验可用于快速检验样品中有无麻毒素。9.1.1操作步骤用微量移液器或刻度吸管吸取120uL处理后的样品，加人检验卡的样品孔，10min后观测结果，15 min 观察终止。9.1.2 结果判定当控制线(C)出现紫红色沉淀线，而检验线(T)不出现紫红色沉淀线时为阴性，即无葩麻毒素检出。当控制线(C)和检验线(T)均出现紫红色沉淀线时为阳性，表明样品中含有葩麻毒素。当控制线(C)和检验线(T)均不出现紫红色沉淀线，或只有检验线（T)出现紫红色沉淀线，表示检验卡失效或实验失败，具体判定模式见图1观察窗样品孔O..c）无沉淀线b）两条沉淀线a）1条沉淀线检验卡结果判断示意图5图 1 9.1.3注意事项可使用等效的试剂盒进行本试验，操作步骤和结果判定应按试剂盒说明书进行。9.2ELISA 定性试验9.2.1试验材料聚苯乙烯96孔酶标板或酶标条，微量移液器50αL、100μL、200μL小烧杯50mL，玻璃棒直径大于等于 5mm,试管 10 mL～25 ml,刻度吸管5 mL、10 mL 和量筒100 mL。9.2. 2 试剂碳酸钠（Na2CO,）、碳酸氢钠（NaHCO）、磷酸二氢钾（KHzPO）、磷酸氢二钠9. 2. 2. 1（NazHPO4·12H²O)、氯化钠(NaCl)、氢化钾（KCl）、吐温-20（Tween-20）、牛血清白蛋白（BSA）、浓硫酸(98%)和四氨基联苯胺(TMB)，上述试剂均为分析纯,存放于常温通风干燥处。篦麻毒素单克隆抗体、HRP标记的抗葩麻毒素单克隆抗体、阳性对照（重组葩麻毒素）、阴性对照（PBS溶液，0.01 mol/L，pH7.2),均一20℃保存。0.85%生理盐水，pH6.50.15mol/LPBS缓冲液，