NY 550-2002动物和动物产品沙门氏菌检测方法.pdf

ICS ,11. 220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 550—2002动物和动物产品沙门氏菌检测方法Defection methods of salmonella for animaland animal products2002-12-01 实施2002-08-27 发布中华人民共和国农业部发布 中华人民共和国农业行业标推动物和动物产品沙门氏菌检测方法NY/T 550—2002*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售*开本880×12301/16印张1/2字数10千字2002年12月第一版　2002年12月第一次印刷印数 1-1 500 NY/T 550--2002前 言沙门氏菌是一种重要的人畜共患的肠道病原菌，也是引起食物中毒的重要病原菌,有重要的公共卫生意义。本标准的生化初筛和签定同步进行，血清凝集试验直接使用三糖铁琼脂斜面上新鲜菌苔做抗原。本标准由农业部畜牧兽医局提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位：厦门进出境检验检疫局、福建省卫生防疫站。本标准主要起草人：李碧萍、孙福泉、谢一俊、林炳玲。 NY/T 550--2002动物和动物产品沙门氏菌检测方法1范围本标准规定了动物和动物产品沙门氏菌检测方法。本标准适用于动物和动物产品的沙门氏菌检测。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB4789.4-1994食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.28--1994食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3检测方法3.1器材天平、均质器、乳钵、培养箱、广口瓶、试管、吸管、平皿、玻棒。3.2培养基和试剂3.2.1缓冲蛋白陈水(BP)：配制方法见GB4789.28-1994中4.12。氯化镁孔雀绿增菌液（MM）：配制方法见GB4789.28—1994中4.13。3.2.23.2.3四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）：配制方法见GB4789.28—1994中4.14、4.15。亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)：配制方法见GB4789.28—1994中4.16。3.2. 43.2.5 胆硫乳琼脂(deoxycholate hyadrogen sulfiale lactose agar, DHL):配制方法见 GB 4789.28-1994 中 4. 20。苏木素伊红(HE)琼脂(hektoen enteric agar):配制方法见 GB 4789.28—1994 中 4.21。3.2.6WS琼脂：配制方法见GB4789.28—1994中4.23。3.2.7三糖铁琼脂(TSI)：配制方法见GB4789.28--1994中4.26或4.27。3.2.8氨基酸脱羧酶试验培养基：配制方法见GB4789.28-1994中3.12。3.2.93）邻硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)培养基：配制方法见GB4789.28-1994中3.3。3.2.103.2.11甘露醇糖发酵管培养基(MAN)：配制方法见GB4789.28—1994中3.2。3.2.12沙门氏菌因子血清：26种用于初步分型：163种用于详细分型。3.3采样及制备检样3.3.1依检测需要采集样品或按相关规定采样。3.3.2检样的制备：冷冻样品、固体样品需用匀质器以8000r/min～10000r/min打碎1min，或用乳钵研磨制成检样：液体样品、粉状样品用灭菌玻棒搅匀。3.4检测程序沙门氏菌检测程序见图1。 NY/T 550--2002制备样品 25 g+BP 液225 mL36℃±1 ℃16 h ~ 20 h1 mL+TTB 波(或MM波)10 mL1 ml+SC 液 10 mL36 ℃±1 ℃ ↓ 18 h ~ 24 h18 h ~ 24 h42DHL琼脂（或 HE 琼脂或WS 琼脂）1携取可疑菌落TSI ONPG 甘露醇糖发醇管36℃±1℃ 18 h ~ 24 h判定结果血清学鉴定报告图 1 沙门氏菌检测程序3.5操作步骤3.5.1前增菌和增菌3.5.1.1冻品、蛋品、乳制品、鱼粉及其他经加工的动物产品均应经过前增菌。称取制备样品25g，加人装有225mLBP液的广口瓶中，用无菌玻棒搅勾，36℃士1℃培养16h～20h前增菌。移取1mL转种于10 mL TTB或MM增菌液中,42℃培养18h～24 h。另取1mL转种于10mL SC增菌液中,36℃±1℃培养 18 h～24