SNT 1987-2007进出口动物源性食品中雷复尼特残留量的检测方法 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1987-2007动物源食品中雷复尼特残留量的检测方法高效液相色谱法Determination of rafoxanide residues in foodstuffs of animal origin-High performance liquid chromatography2007-08-06发布2008-03-01实施中华人民共和国床层综器感章该 0发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1987--2007前言本标准的附录 A 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国沈阳出人境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局负责起草本标准主要起草人：林维宣、姚家彪、康庆贺、金雁、杨芬、杨长志、冷艳霞、王宏伟。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1987—2007动物源食品中雷复尼特残留量的检测方法高效液相色谱法1范围本标准规定了动物源食品中雷复尼特的高效液相色谱检测方法。本标准适用于牛肉、牛肝和牛肾中雷复尼特残留量的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法3方法提要样品用乙提取、中性氧化铝柱净化后浓缩定容，用配备紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的-级水。4.1　乙腈：色谱纯。4.2 磷酸(85.0%)。4.3磷酸水溶液(pH2.5):水用10%磷酸调至pH=2.5。4.4正丙醇。4.5中性氧化铝：层析用100目～200目，300℃灼烧4h，置干燥器中备用。4.6雷复尼特标品(Rafoxanide,C1gHnCl2I2NO;,CAS:22662-39-1）:纯度≥98.5%。4.7雷复尼特标准储备溶液：准确称取0.005g雷复尼特标准品，用少量丙酮溶解后用乙睛定容至10mL,浓度为0.5mg/mL，1℃～4℃保存,有效期为2个月。4.8标准工作溶液：根据需要用流动相稀释成适当浓度的标准工作溶液。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。5.2绞肉机。5.3均质器。5.4 离心机。5.5旋转蒸发器。5.6 离心管:100 mL。5.7 鸡心瓶:150 mL。5.8层析柱：100×10 mm(内径)具塞玻璃柱。 SN/T 1987-—20076测定步骤6.1样品制备从所送样品中取出有代表性样品约500g,将其用绞肉机绞碎，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻保存。6.2提取称取试样10g（精确至0.01g），加20mL乙，以10000r/min均质1min后，以4000r/min离心5 min,取上清液。沉淀物再用10 mL乙腈重复提取一次,合并上清液。6.3　净化将上述提取液直接过填装2g的经10 mL乙腈活化过的中性氧化铝柱，待液面接近氧化铝层上端时再加 5 mL乙腈,流速约为1mL/min~收集所有流出滤于鸡瓶史 5 mL正丙醇,在 40℃下旋转浓缩至近干，用流动相溶解并定容到1ml对045滤膜，高效液相色谱测定。6.4　测定6.4.1液相色谱条件色谱柱：C1g柱,250X4.6mm(内径）,5 μms或相当者a)流动相：乙腈：磷酸水溶液（pH2.5)83：1体积比）b)c)流速:1.5 mL/min;柱温:30℃;d)e)检测波长：282 nm；f)进样量:20 μL。6.4.2高效液相色谱测定根据试样中雷复尼特的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液，对标准工作溶液和样液等体积检测的线性范围内。色谱图参见参插进样，测定标准工作溶液和样液中雷复龙特的响应附录 A。6.4.3空白试验除不加试样外，均按上述测定春骤进行7 结果计算和表述用色谱数据处理仪或按式(1)针算试样中蕾复尼特的残留名量，计结果需扣除空白值。AXs V(1)XAskm二号式中：-试样中雷复尼特的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg)；X-A-一样液中雷复尼特的峰面积；As---标准工作溶液中雷复尼特的峰面积；-标准工作溶液中雷复尼特的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)；V-样液最终定容体积，单位为毫升（mL）;最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。m8方法的测定低限和回收率8.1测定低限本方法雷复尼特残留量的测定低限为0.01mg/kg。8.2回收率牛肉、牛肝、牛肾中雷复尼特的添加浓度及其回收率