Benzonase核酸酶残留检测试剂盒.docx

Benzonase 核酸酶残留检测试剂盒Cat. No.: Benzonase 核酸酶残留检测试剂盒 Cat. No.: C2005 Size：50T Web: 免费热线：400-0470-600 Web: 免费热线：400-0470-600 Email: order@ 注意：本产品仅供研究用，请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。 描述：Benzonase 可高效降解任何形式的核酸， 广泛用于蛋白等生物制品中核酸的去除。在处理过的生物制品中，可 能存在微量 Benzonase 残留，这些微量残留会对后续生物制品的应用造成一定的影响。生物制品中 Benzonase 的残留量是衡量生物制品质量的重要指标之一。 目前， Benzonase 核酸酶残留检测多基于免疫吸附 ELISA 的检测方法， 由于其方法自身的限制，测量并不准确，主要体现在以下方面：（1）检测抗体的亲和性能差异大，受环境影响大；（2）检测抗体的非特异性交叉反应；（3）生物制品本身蛋白浓度差异，造成的亲和吸附差异。 HaiGene 全新研发的基于荧光探针的 Benzonase 核酸酶残留检测方案，成功避开以上缺点，实现了高重复性、高准确 度、高灵敏度检测。在无 Benzonase 核酸酶的样品中，该探针是稳定存在的，不会产生荧光信号；含有核酸酶残留的 样品中，核酸酶可将荧光标记的 DNA 探针切割，从而产生逐渐增强的荧光信号。该方法可检测 1.5~50ng/ml 的核酸酶残留，操作简单，只需加入 Benz Detection Solution 和待检样品，在定量 PCR 仪上 15min 内即高准确度完成检测。 名称 名 称 2×Benz Detection Solution 标准品 A（25ng/ml） 标准品 B（12.5ng/ml） 标准品 C（6.3ng/ml） 标准品 D（3.1ng/ml） 标准品 E（1.5ng/ml） 样品稀释液 50T 1ml 100μl 100μl 100μl 100μl 100μl 1.5ml 准备工作 由于 Benzonase 核酸酶消化迅速，在进行检测操作前务必将定量 PCR 仪的程序、样品编号提前设置完毕，检测操作完成后立即上机检测。 所有试剂，室温融化待用，实验完成后所有试剂再放置 于-20℃或-80℃保存。 检测操作 样品准备 首次检测，可将待检测样品用样品稀释液稀释 2 倍、5 倍、10 倍后备用。稀释倍数取决于样本中 Benzonase 核酸酶的残留水平。 荧光定量PCR 仪设置 关掉定量 关掉定量 PCR 仪的热盖功能，反应体积 20μl。 Step 1 Step 2 37℃ 10s 37℃ 20s FAM 通道收集信号 40 cycles 定量 PCR 仪的热盖功能设置，不同机型可能不同，如不熟悉设置功能，可联系设备供应商询问。 加样操作 在每一个 0.2ml EP 管底部（建议采用 8 联管或 96 孔板）加入 20μl 标准品或待检测样品（见实验排表 1）。 ）所用样品加完后，快速的在每个样品中加入 20μl 2×Benz Detection Solution，盖上管盖或膜。手腕用力将样品甩至管底。（本步操作请尽可能快，通常 45s 内完成，缓慢的操作，将影响检测结果准确性），然后迅速将检测样品 放置 PCR 仪上运行。 表 1 实验操作工作表 应用： 重组蛋白或其它生物制品中的核酸酶残留检测。 特别注意事项： 该制品仅限于 HaiGene 生产的 Benzonase 核酸酶 （C2001-C2004），其它供应商生产的制品，可能不适用，无法提供数据支持。 保存： -20℃保存 6 个月，-80℃保存 18 个月。  管 1 管 2 管 3 管 4 管 5 管 6 管 7 管 8 管 9 管 10 用途 样品稀释液 标准品 A（25ng/ml） 标准品 B（12.5ng/ml） 标准品 C（6.3ng/ml） 标准品 D（3.1ng/ml） 标准品 E（1.5ng/ml） 检测样品原液 检测样品稀释 2 倍产物 检测样品稀释 5 倍产物 检测样品稀释 10 倍产物 用量20μl 20μl 20μl 20μl 20μl 20μl 20μl 20μl 20μl 20μl 用途 阴性对照标准曲线标准曲线标准曲线标准曲线标准曲线浓度测定浓度测定浓度测定浓度测定 图 2 标准曲线 3530 35 30 y = 1.6897e5.1296x R2 = 0.965 25 20 15 10 5 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 读取荧光信号值 该方案不同于标准定量 PCR 的数据处理方法，并不是去读取相同荧光值下的 Ct 值，而是