SN_T 5137-2019华僧螺检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01B 16SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5137—2019华僧螺检疫鉴定方法Detection and identification of Monacha cartusiana (Muller, 1774)2019-09-03发布2020-03-01实施广中国海司出版社有限公司中华人民共和国海关总署发布HG944440017800【“割开涂层微活密码“”】 SN/T 5137—2019前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建海关、中国湿地博物馆、中华人民共和国杭州海关、中华人民共和国张家港海关。本标准主要起草人：王沛、杨海芳、王武军、周卫川、吴志毅、陆军、林阳武。- SN/T 5137-2019华僧螺检疫鉴定方法1范围本标准规定了华僧螺的检疫鉴定方法。本标准适用于华僧螺的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T3067---2011软体动物常规检疫规范3术语和定义SN/T3067--2011界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1鞭状体flagellum蜗牛雄性生殖系统中的附器，一般由阴茎本体末端分枝形成。3.2受精囊bursacopulatrix蜗牛的受精器官，其中受精囊的大小及受精囊柄的形态和有无分支常用于分类鉴定。3.3矢囊dart sack蜗牛生殖系统中一个藏有1枚中空的钙质或壳质骨针的肌肉质的囊。一般用长径与短径之比来描述矢囊的相对长度。3.4阴茎 penis阴茎系统一般由阴茎、阴茎本体、阴茎牵引肌和鞭状体组成，其中后三者常因种类不同而缺失。3.5壳口 aperture贝壳开口部位，是蜗牛头和腹足的出口，一般无齿、片、褶等结构。壳口的边缘为口唇，按其在壳口中的位置不同可分为内唇、外唇、轴唇、基唇、上唇和下唇等，内唇常贴覆于体螺层上形成肼眠部。3.6轴唇columellalip贝壳壳口的边缘为口唇，按其在壳口中的位置不同可分为内唇、外唇、轴唇、基唇、上唇和下唇，靠近螺轴的口唇即称轴唇，有些种类的轴唇常外折导致脐孔部分或完全被覆盖。4基本信息学名:Monacha cartusiana(Muller,1774)。r SN/T 5137—2019异名:Heli cartusiana Muiller,1774。英文名:Carthusian snail,Chartreuse snail。中文名：华僧螺。分类地位：软体动物门Mollusca，腹足纲Gastropoda，柄眼目Stylommatophora，湿螺科Hygromiidae，僧螺属Monacha。僧螺属有3亚属，记录种49个，华僧螺同亚属的近似种有紫僧螺M.cantiana（Montagu，1803）和叙利亚僧螺M.syriaca（Ehrenberg，1831）。华僧螺的其他信息参见附录A。5方法原理传播方式和生态习性是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态和软体解剖是实验室鉴定的主要依据，分子特征作为不具备形态学鉴定样品的鉴定依据。6器具和试剂6.1仪器和用具仪器：体视显微镜、微型离心机、恒温金属浴、PCR仪、凝胶照相系统。用具：放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4mm孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、塘瓷盘、培养Ⅲ、镊子、剪刀、小剪刀、显微镊子、显微剪刀、微针（直径0.15mm）、解剖蜡盘、标签、1.5mL离心管、0.2mLPCR反应管、移液枪。6.2试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯。乙醇、硫酸镁、动物基因组DNA提取试剂盒、PCRMasterMix、ddH2O。7现场检疫对来自疫区（参见附录A)的运输工具和货物实施重点查验。仔细检查运输工具、废塑料、木质包装箱、苗木、水果、蔬菜、花卉、未经加工的植物性材料等是否有蜗牛附着其上，尤其要注意阴暗蔽光处的检查，用手电筒仔细寻找蜗牛的行迹。华僧螺爬行过后，一般都会留下银灰色的丝带状黏液痕迹，这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛，随时装人塑料自封袋或标本瓶带回实验室做进一步的检验鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时，需过筛检查是否有卵或幼螺。8实验室鉴定8.1测量、观察、解剖和饲养用游标卡尺测量蜗牛贝壳的壳高和壳宽、卵粒的直径或长和宽。用肉眼或放大镜或体视显微镜仔细观察卵、贝壳和螺体的形态特征。将闷杀处理（见10.1)后的标本，按照SN/T3067一2011中8.3.1进行软体解剖，分离出生殖系统。单独查获的卵粒，按照SN/T3067—2011中8.4