GA 655-2006人毛发ABO血型检测解离法.pdf

GAICS 13.310A 92中华人民共和国公共安全行业标准GA 655--2006人毛发ABO而血型检测解离法Detection method for ABO blood type in human hairs--Elution test2006-11-03 发布2007-03-01 实施中华人民共和国公安部发布数码防伪 GA 655—2006本标准的 4.1a)为强制性的,其余为推荐性的。本标准的附录A为规范性附录。本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。本标准起草人：温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李澎、刘旭丹、常彩琴、张英兰、李兆隆等。 GA 655—2006人毛发 ABO 血型检测解离法1范围本标准规定了法医生物物证检验中人毛发ABO血型检测的材料准备、操作方法和结果判定。本标准适用于从事法庭科学检验人毛发ABO血型。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标推。GA 471—2004 抗 A、抗 B血清试剂3原理解离法是利用抗原和抗体反应所形成的抗原抗体复合物，在一定条件下抗原抗体复合物可以释放抗体，而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。毛发检材中的ABO血型物质存在于髓质中，在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下，发生抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物。当在50℃～56℃条件下，抗原抗体复合物发生解离，使抗体游离于液体中，当温度降低至37℃左右时，游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应，在显微镜下可观察到凝集块。根据与相应指示红细胞发生凝集反应的情况,可判断 ABO 血型。4 试剂与器材4.1 试剂a）标推抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA 471一2004的各项要求；b）A 型、B型指示红细胞悬液(0.2%)(见附录 A);c）无水乙醇d）无水乙醚;e）洗涤液;f）生理盐水。4.2器材a）台式离心机；b）光学显微镜；c）负压吸引装置；d）恒温箱;e）冰箱;f)加样器、加样器吸头；g)眼科剪、眼科镊；h)，压毛机或其他替代设备、器材；i)凹玻板;j)载玻片、盖玻片、载玻片架、保湿盒、毛细管；k）记号笔、滤纸、脱脂棉。 GA 655--20065操作方法5.1 取待检毛发，用洗涤剂清洗，然后用无水乙醇浸泡 20 min～30 min 脱水，无水乙醚浸泡 10 min脱脂。5.2用压毛机(也可用其他方法)将毛发压扁，使其暴露出毛发髓质，压后其直径约为压前的3倍～4倍。5.3用洁净的眼科剪剪取压好的毛发两段，每段约0.4 cm，分别置于凹玻板对应的上下两凹内，并分别标记 A 与 B。5.4按标记，分别在两凹内滴加相应的标准抗A、标准抗B抗体试剂各1滴～2滴，使毛发完全浸在抗体试剂中。将凹玻板置于保湿盒内,在负压760 mmHg下，吸收 20 min，取出保湿盒，将其置于 4℃冰箱中,吸收 3 h4 h 或吸收过夜。5.5取出毛发后,用滤纸轻轻吸去标准 A、B血清液体，然后将毛发分别置于另一冷的凹玻板上下两凹内，用冷生理盐水洗涤4次～6次，最后，用吸管将洗涤用生理盐水液吸去，用洁净的眼科镊将毛发分别置于载玻片两端,并分别标记 A与B。5.6在A、B两段的毛发上，分别滴加4.1b)中相应的指示红细胞悬液1滴，分别加盖玻片，并置56℃恒温箱中 5 min～10 min。5.7从恒温箱中取出并置于室温保湿盒内，10 min～20 min后，取出载玻片，显微镜下观察凝集情况，记录凝集情况，结果判定。6 结果判定结果判定见表 1。表1解离法检测人毛发 ABO 血型结果判定毛发检材编号A侧B侧结果判定012++B3+AB4+7注意事项7.1检验的同时应取已知血型的毛发检材做对照，并只有当已知对照毛发结果正确时,样本的检验结果才能采信。7.2指示红细胞应新鲜配置，并在显微镜下检查有无自凝集现象，隔天使用应进行洗涤。另外，指示细胞为同型多人份混合血液制备的较好。7.3抗体的效价不应低于1：128倍。7.4毛发压扁的程度，以暴露髓质而又不使毛干分离为宜。7.5抗体吸收时间不应少于 3 h～4 h。7.6若无条件负压吸收，则应放于4℃冰箱，适当延长吸收时间，使之充分吸收。7.7吸收后的洗涤次数应根据洗涤的手法、轻重而相应调整。7.8加盖玻片时，应避免出现气泡。7.9在判断结果时,除了应考虑阳性和阴性对照外,还要注意 A、B抗原性的不均衡性,有时需要适当调高标准抗A抗体试剂效价。2 GA 655--2006附录A(规范性附录)指示红细胞配制